基因X的表達(dá)產(chǎn)物可保護(hù)損傷的神經(jīng)細(xì)胞?？茖W(xué)家構(gòu)建了含X的基因表達(dá)載體（圖1），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)據(jù)此回答下列問(wèn)題：

（1）構(gòu)建含X的基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選擇圖1中的

BamHⅠ

BamHⅠ

限制酶。
（2）酶切后的載體和基因X進(jìn)行連接，可產(chǎn)生3種連接產(chǎn)物：?jiǎn)蝹€(gè)載體自連，基因X與載體正向連接、基因X與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種產(chǎn)物，選擇EcoRI酶和HindHⅢ酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中1、2、3泳道分別對(duì)應(yīng)的載體的連接方式是

載體自連

載體自連

、

反向連接

反向連接

、

正向連接

正向連接

。
（3）在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過(guò)程中，可使用

胰蛋白酶或膠原蛋白

胰蛋白酶或膠原蛋白

酶將細(xì)胞分散開(kāi)。分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱(chēng)為

細(xì)胞貼壁

細(xì)胞貼壁

。
（4）將正向連接的重組載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測(cè)基因X是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可用

分子雜交

分子雜交

技術(shù)。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行

傳代

傳代

培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。