塑料制品方便人們生活的同時，也造成了短時期難以降解的“白色污染”。研究人員欲比較腸桿菌YT1和芽孢桿菌YP1兩類細菌降解塑料（主要成分為聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，兩類細菌主要降解PE）的能力，并通過基因工程拼接黃粉蟲腸道內(nèi)菌株WZ的降解PVC的胞外酶基因CD3D，培育降解塑料的“超級菌”。
（1）菌株的篩選。配制固體培養(yǎng)基，接種菌株后表層覆蓋0.1mm厚度的PE塑料。分組實驗結(jié)果如圖所示：
| 培養(yǎng)基及接種菌株 | 培養(yǎng)基1 | 培養(yǎng)基2 | 培養(yǎng)基3 |
| 單獨培養(yǎng)并接種YT1 | 單獨培養(yǎng)并接種YP1 | 混合培養(yǎng)YT1和YP1后，選取YP1接種 | |
| 降解圈（直徑D/mm） | 3.5 | 1.8 | 4.2 |
PE塑料
PE塑料
為唯一碳源的培養(yǎng)基，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 選擇培養(yǎng)基
選擇培養(yǎng)基
。②篩選分解PE塑料能力強的菌株不能直接以降解圈的大小為指標，其原因是
因為菌體繁殖力不同，形成的菌落大小不同
因為菌體繁殖力不同，形成的菌落大小不同
。培養(yǎng)基3中接種混合培養(yǎng)后的YP1，其降解圈直徑明顯加大，其原因可能是 YP1和YT1混合培養(yǎng)過程中，YP1菌株整合了YT1的對PE塑料高分解力的基因，發(fā)生了轉(zhuǎn)化
YP1和YT1混合培養(yǎng)過程中，YP1菌株整合了YT1的對PE塑料高分解力的基因，發(fā)生了轉(zhuǎn)化
。（2）培育“超級菌”。對菌株WZ改造后的CD3D基因進行研究，把CD3D基因和His標簽基因（His標簽由6個組氨酸組成）連接起來構(gòu)建融合基因，并構(gòu)建重組基因表達載體，如圖為載體、CD3D基因的結(jié)構(gòu)、不同限制酶的識別序列及切割位點，欲將標簽基因連接在CD3D基因編碼區(qū)的末端，已知組氨酸的密碼子為CAU，終止密碼子為UAG。
限制酶識別序列及切割位點：MunⅠ：CAATTG、XhoⅠ：CTCGAG、BcoRⅠ：G↓AATTC、SalⅠ：G↓TCGAC
①寫出His的基因編碼鏈的堿基序列5′
CATCATCATCATCATCATTAG
CATCATCATCATCATCATTAG
3′。②為構(gòu)建融合基因并將其插入載體，科研人員設計了一對與CD3D基因編碼區(qū)兩端序列互補配對的引物，設計時需在引物
B
B
（填“A”或“B”）的5′端增加相應的限制酶識別序列和His基因的編碼序列，請寫出該引物開頭的12個堿基序列：5′CTCGAGCTAATG
CTCGAGCTAATG
3′。【答案】PE塑料；選擇培養(yǎng)基；因為菌體繁殖力不同，形成的菌落大小不同；YP1和YT1混合培養(yǎng)過程中，YP1菌株整合了YT1的對PE塑料高分解力的基因，發(fā)生了轉(zhuǎn)化；CATCATCATCATCATCATTAG；B；CTCGAGCTAATG
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/29 8:6:34組卷：8引用：1難度：0.7
相似題
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規(guī)律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5