土壤中的磷主要以難溶性無(wú)機(jī)磷酸鹽形式存在,很難被植物吸收利用。已知解磷細(xì)菌可以溶解難溶性無(wú)機(jī)磷酸鹽,提高土壤的肥力。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)在進(jìn)行解磷細(xì)菌培養(yǎng)與分離時(shí),需要用到固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基配制時(shí)需將各種成分逐一添加后加熱、融化,為防止培養(yǎng)基焦糊,需邊加熱邊
攪拌
攪拌
。常用的固體培養(yǎng)基有固體平板培養(yǎng)基和試管斜面培養(yǎng)基(如圖),制備試管斜面培養(yǎng)基過(guò)程中的下列操作,正確的先后順序是 ①②③
①②③
。
①調(diào)節(jié)pH
②分裝到試管
③濕熱滅菌
(2)科研工作者通過(guò)分離、培養(yǎng)解磷細(xì)菌制備菌肥,應(yīng)用到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,其簡(jiǎn)要過(guò)程如表所示,請(qǐng)完成表格。
操作步驟 |
簡(jiǎn)要操作過(guò)程 |
操作過(guò)程的目的 |
步驟一 |
稱(chēng)取土樣,在富含有① 難溶性無(wú)機(jī)磷酸鹽 難溶性無(wú)機(jī)磷酸鹽 的液體培養(yǎng)液中培養(yǎng)4天 |
富集培養(yǎng),增加解磷細(xì)菌的數(shù)量 |
步驟二 |
用稀釋涂布平板法涂布在以①為唯一② 磷源 磷源 的固體平板培養(yǎng)基上 |
③ 獲得解磷細(xì)菌單菌落 獲得解磷細(xì)菌單菌落 |
步驟三 |
挑選并發(fā)酵培養(yǎng) |
獲得大量解磷細(xì)菌懸液 |
步驟四 |
發(fā)酵過(guò)程中混勻發(fā)酵液后進(jìn)行④ 抽樣 抽樣 并系列稀釋?zhuān)芒?!--BA-->顯微計(jì)數(shù) 顯微計(jì)數(shù) 法檢測(cè)細(xì)菌數(shù)量 |
隨時(shí)檢測(cè)發(fā)酵液中細(xì)菌數(shù)量 |
步驟五 |
結(jié)束發(fā)酵,分裝 |
制成液體或固體解磷菌肥 |
(3)步驟二也可利用平板劃線(xiàn)法來(lái)代替稀釋涂布平板法。平板劃線(xiàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)平板太軟,表面極易劃破。請(qǐng)?zhí)峁┙鉀Q此問(wèn)題的合理化建議是
適當(dāng)增加培養(yǎng)基中瓊脂的含量
適當(dāng)增加培養(yǎng)基中瓊脂的含量
。某普通解磷細(xì)菌由于突變而形成了一種高效解磷細(xì)菌,在分離純化該突變菌株時(shí),科研工作者一般使用稀釋涂布平板法而很少使用平板劃線(xiàn)法,從實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡慕嵌确治?,可能的原因?
平板劃線(xiàn)法只能在末端獲得少量的單菌落,會(huì)減少獲得突變菌株的概率
平板劃線(xiàn)法只能在末端獲得少量的單菌落,會(huì)減少獲得突變菌株的概率
。
(4)步驟四中,對(duì)某批次發(fā)酵液進(jìn)行系列稀釋和接種,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),其過(guò)程及結(jié)果如圖2。則該批次發(fā)酵液中活菌數(shù)為
2×107
2×107
cfu/mL(活菌數(shù)量用菌落形成單位cfu表示)。