腫瘤細胞可以表達CD47蛋白，并與吞噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白a（SIRPa）結(jié)合，向吞噬細胞發(fā)出“別吃我”的信號，以逃脫機體免疫系統(tǒng)的攻擊。因此阻斷CD47/SIRPa信號，有望恢復(fù)吞噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用。下圖是利用CD47蛋白制備相應(yīng)單克隆抗體的過程。請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：
（1）單克隆抗體制備過程涉及細胞工程中的 動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)和 動物細胞融合動物細胞融合技術(shù)，涉及的原理是 細胞增殖和細胞膜的流動性細胞增殖和細胞膜的流動性，在進行動物細胞培養(yǎng)過程中要先用 機械法機械法法或 胰蛋白酶、膠原蛋白胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理動物組織，分散成單個細胞。
（2）圖中a操作是要獲得已免疫的 B淋巴細胞B淋巴細胞。
（3）誘導(dǎo)過程b融合的方法有 PEG融合法、滅活的病毒誘導(dǎo)法、電融合法PEG融合法、滅活的病毒誘導(dǎo)法、電融合法（至少寫兩種）。
（4）在單克隆抗體制備的過程中要進行多次篩選，第一次篩選過程中的HAT培養(yǎng)基從用途上看屬于 選擇選擇培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，從而篩選得到雜交瘤細胞。對上述培養(yǎng)的雜交瘤細胞，進行克隆化培養(yǎng)和 抗體抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合；細胞增殖和細胞膜的流動性；機械法；胰蛋白酶、膠原蛋白；B淋巴細胞；PEG融合法、滅活的病毒誘導(dǎo)法、電融合法；選擇；抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：1難度：0.7
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1．為實現(xiàn)對肝癌的有效治療，研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點，制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時，應(yīng)提取區(qū)基因序列用于設(shè)計抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取細胞，誘導(dǎo)其與骨髓瘤細胞融合，利用篩選得到雜交瘤細胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無關(guān)抗體-DMI）分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞，檢測細胞活力，結(jié)果如圖1：
由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞，依據(jù)是。
（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是。發(fā)布：2024/12/19 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.6 -
2．為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用，某研究團隊對鼠源單克隆抗體F進行改造，制備了人—鼠嵌合抗體F′，具體流程為：提取鼠源雜交瘤細胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴增抗體F的基因序列，將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進行替換，再構(gòu)建表達載體，在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì)，他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用（F′與F初始濃度相同）時F′對抗原的結(jié)合能力，結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/19 1:0:1組卷：39引用：4難度：0.5 -
3．2020年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/19 6:0:1組卷：42引用：2難度：0.6
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