某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。

回答下列問題：
（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質是

瓊脂

瓊脂

。甲、乙培養(yǎng)基均屬于

選擇

選擇

培養(yǎng)基。
（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數為2×10⁹個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋

10⁴

10⁴

倍。
（3）在步驟的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是

細菌細胞由于滲透作用失水過多，喪失活性（S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長）

細菌細胞由于滲透作用失水過多，喪失活性（S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長）

（答出1點即可）。
（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數，請寫出主要實驗步驟：

淤泥中取樣，然后進行梯度稀釋，微生物的培養(yǎng)與觀察，計數[取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數]

淤泥中取樣，然后進行梯度稀釋，微生物的培養(yǎng)與觀察，計數[取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數]

。
（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即

水、無機鹽、碳源、氮源

水、無機鹽、碳源、氮源

。