匙葉草是一種泌鹽植物??蒲泄ぷ髡邔⒊兹~草液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi),獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶,圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn);圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖;圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題:

(1)若圖1所示DNA片段是利用匙葉草的DNA直接獲得的,則該獲取目的基因的方法為從基因文庫(kù)中獲取從基因文庫(kù)中獲取。
(2)不能在匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA,其原因是匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中的TaNHX2基因不表達(dá)匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中的TaNHX2基因不表達(dá)。
(3)若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段,獲得目的基因,則需選用Sau3AⅠSau3AⅠ切割圖3所示質(zhì)粒,以便構(gòu)建基因表達(dá)載體,該方案的缺陷是會(huì)出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定會(huì)出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定(答出兩點(diǎn))。為了避免上述缺陷,切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用酶EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ,切割圖3所示質(zhì)粒的方案是選用酶EcoRⅠ和Sau3AⅠEcoRⅠ和Sau3AⅠ。
(4)用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體,所得重組質(zhì)粒不一定能不一定能(填“能”、“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。
(5)圖3中,質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】從基因文庫(kù)中獲??;匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中的TaNHX2基因不表達(dá);Sau3AⅠ;會(huì)出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定;EcoRⅠ和BamHⅠ;EcoRⅠ和Sau3AⅠ;不一定能;篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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