動物血液常常被選作提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)材料,請回答下列有關(guān)問題:
(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要在采血容器中預(yù)先加入 檸檬酸鈉檸檬酸鈉,其作用是 防止血液凝固防止血液凝固。樣品處理及粗分離應(yīng)包括 紅細(xì)胞的洗滌紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析。
(2)下列試劑或儀器可用于血紅蛋白釋放的是 BDFBDF。
A.0.9%的生理鹽水
B.甲苯
C.磷酸緩沖液
D.蒸餾水
E.離心機(jī)
F.磁力攪拌器
(3)凝膠色譜法分離血紅蛋白質(zhì)中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG-75),其中G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及 分離范圍分離范圍,75的含義是 每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5克每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5克。為加快凝膠膨脹,可以將濕凝膠用沸水浴加熱,這樣不僅節(jié)約時(shí)間,還能 去除凝膠中帶有的微生物,排除凝膠內(nèi)的空氣去除凝膠中帶有的微生物,排除凝膠內(nèi)的空氣。填裝凝膠柱時(shí)不得有氣泡,原因是 氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果。
(4)電泳是分離鑒定蛋白質(zhì)的常用方法。一個(gè)蛋白質(zhì)分子在某pH溶液時(shí),蛋白質(zhì)解離成正負(fù)離子,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)凈電荷為0時(shí)對應(yīng)的溶液pH稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(pI)。蛋白質(zhì)所處溶液pH>pI時(shí),蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,反之帶正電荷。下表為幾種血清蛋白的等電點(diǎn),將血清蛋白在pH=8.6的緩沖液中進(jìn)行電泳,結(jié)果如圖所示。
蛋白質(zhì)種類 | 清蛋白 | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
等電點(diǎn)(pI) | 4.84 | 5.06 | 5.06 | 5.12 | 6.8~7.3 |
清蛋白
清蛋白
,α1和α2球蛋白分子量較小的是 α1球蛋白
α1球蛋白
。【考點(diǎn)】蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的綜合.
【答案】檸檬酸鈉;防止血液凝固;紅細(xì)胞的洗滌;BDF;分離范圍;每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5克;去除凝膠中帶有的微生物,排除凝膠內(nèi)的空氣;氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果;清蛋白;α1球蛋白
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:3難度:0.4
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