矮牽牛是一種常用的園林綠化植物。研究人員利用農(nóng)桿菌轉化法將外源基因D轉入到矮牽牛細胞中,最終獲得了能開藍花的矮牽牛。如圖為Ti質(zhì)粒和目的基因的部分結構模式圖,以及限制酶1、酶2、酶3的酶切位點。請回答:
(1)Ti質(zhì)粒由Con區(qū)段、Vir區(qū)段、T-DNA區(qū)段、啟動子等組件構成。啟動子的作用是
與RNA聚合酶結合并驅(qū)動基因的轉錄
與RNA聚合酶結合并驅(qū)動基因的轉錄
。通過農(nóng)桿菌轉化法,最終將基因D整合到植物細胞的染色體DNA
染色體DNA
上。
(2)研究發(fā)現(xiàn),農(nóng)桿菌在酚類物質(zhì)的作用下產(chǎn)生酶(甲),該酶識別T-DNA區(qū)段并將其中的一條鏈切割下來,TDNA單鏈進入植物細胞并在受體細胞酶的作用下形成雙鏈。甲不屬于
不屬于
(填“屬于”或“不屬于”)限制酶,理由是限制酶能識別雙鏈DNA并斷開DNA的雙鏈,甲只能切割T-DNA的一條鏈
限制酶能識別雙鏈DNA并斷開DNA的雙鏈,甲只能切割T-DNA的一條鏈
。有學者認為,在酚類物質(zhì)的作用下,酶甲的合成只與Vir區(qū)段中的基因有關,與Con區(qū)段無關。用實驗驗證該觀點是否正確,合理的實驗設計思路是將分別剔除了Vir和Con區(qū)段的Ti質(zhì)粒轉入到農(nóng)桿菌中,在含有酚類物質(zhì)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)農(nóng)桿菌并檢測細胞中有無甲的產(chǎn)生
將分別剔除了Vir和Con區(qū)段的Ti質(zhì)粒轉入到農(nóng)桿菌中,在含有酚類物質(zhì)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)農(nóng)桿菌并檢測細胞中有無甲的產(chǎn)生
(寫出實驗思路即可)。
(3)在植物組織培養(yǎng)過程中,外植體細胞恢復分裂能力并形成愈傷組織的過程稱作脫分化
脫分化
。研究發(fā)現(xiàn),T-DNA中含有生長素基因(tms)和細胞分裂素基因(tmr)這些基因能在植物細胞中大量表達并影響愈傷組織細胞的增殖和分化。為消除T-DNA中tms、tmr對轉基因矮牽牛的影響,在酶1、酶2、酶3中,用于構建表達載體的限制酶酶1和酶2
酶1和酶2
。