某興趣小組欲從一片樹(shù)林的土壤中取樣分離出分解纖維素的細(xì)菌，用于土壤中廢紙的降解實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)操作流程如圖所示。
土壤提取液

接種

培養(yǎng)基1

接種

剛果紅培養(yǎng)基

接種

培養(yǎng)液

接種

培養(yǎng)基2→計(jì)算種群密度

纖維素	NaNO3	MgSO4	KCl	FeSO4	KH2PO4	蒸餾水
30g	2g	0.5g	0.5g	0.1g	1g	1000mL

（1）興趣小組按上表成分并添加了瓊脂制成了培養(yǎng)基1，培養(yǎng)基中NaNO₃的作用是

提供氮源和無(wú)機(jī)鹽

提供氮源和無(wú)機(jī)鹽

；該培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)中的作用是

分離分解纖維素的細(xì)菌

分離分解纖維素的細(xì)菌

。
（2）實(shí)驗(yàn)操作中有四次接種，每次接種需灼燒接種工具至少

兩

兩

次，以保證無(wú)菌操作。接種后的培養(yǎng)皿要倒置培養(yǎng)，其目的是

減少水分蒸發(fā)，防止污染

減少水分蒸發(fā)，防止污染

。
（3）經(jīng)培養(yǎng)后培養(yǎng)基1上得到三種不同的菌落，用接種針接種到剛果紅培養(yǎng)基的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后得到如圖結(jié)果。應(yīng)選擇

①

①

處的菌落進(jìn)行富集培養(yǎng)，理由是

①處透明圈大，說(shuō)明細(xì)菌分解纖維素的能力強(qiáng)

①處透明圈大，說(shuō)明細(xì)菌分解纖維素的能力強(qiáng)

。
（4）取10mL富集培養(yǎng)后的菌液，加入90mL無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?.1mL稀釋液涂布于培養(yǎng)基平板上。10⁴倍稀釋度下對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板菌落數(shù)分別為32、40和36，每毫升菌液中分解纖維素細(xì)菌的數(shù)量為

3.6×10⁶

3.6×10⁶

個(gè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是

當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

。