乳酸菌在生產(chǎn)生活中有廣泛的應(yīng)用,如泡菜、酸奶、酸筍等食品生產(chǎn)上。乳酸菌在細(xì)胞代謝過(guò)程中會(huì)分泌細(xì)菌素、有機(jī)酸等物質(zhì),細(xì)菌素對(duì)多種食品中常見(jiàn)的致病菌具有廣譜抑菌活性。實(shí)驗(yàn)小組為了檢測(cè)細(xì)菌素的抗菌活性,將富集培養(yǎng)后的乳酸菌菌株分離純化,并接種到MRS液體培養(yǎng)基中。請(qǐng)回答以下問(wèn)題:
(1)利用平板劃線法純化乳酸菌時(shí),所用的接種工具是
接種環(huán)/接種針
接種環(huán)/接種針
,接種前先用 無(wú)菌水
無(wú)菌水
對(duì)乳酸菌菌液進(jìn)行一定濃度的稀釋,第二次及其以后的劃線都要從上一次劃線的 末端
末端
開(kāi)始,目的是 使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,便于獲得單菌落
使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,便于獲得單菌落
。
(2)在泡菜腌制時(shí),用白酒擦拭泡菜壇的目的是 消毒(抑制雜菌)
消毒(抑制雜菌)
,若泡菜壇有砂眼,常導(dǎo)致腌制的泡菜臭而不酸,其原因是 有氧條件下,乳酸菌不發(fā)酵,而其它雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗變臭
有氧條件下,乳酸菌不發(fā)酵,而其它雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗變臭
。
(3)用打孔法測(cè)定乳酸菌分泌的細(xì)菌素對(duì)指示菌的抑菌效果時(shí),應(yīng)該先吸取稀釋的 指示菌
指示菌
菌液涂布到平板中,再使用5mm直徑的打孔器打孔,每孔分別注入離心后的50μLMRS液體培養(yǎng)基的 上清液
上清液
(填“上清液”或“沉淀物”)。培養(yǎng)24h后測(cè)定抑菌圈的直徑,當(dāng)抑菌圈的直徑至少大于 5
5
mm才能判斷為具有抑菌活性。
(4)實(shí)驗(yàn)小組用經(jīng)乳酸調(diào)節(jié)pH至3.5(與發(fā)酵48h后發(fā)酵液的pH相同)的MRS液體培養(yǎng)基作為空白對(duì)照組,觀察其抑菌情況。設(shè)置該組實(shí)驗(yàn)的目的是 排除有機(jī)酸對(duì)細(xì)菌的抑制作用
排除有機(jī)酸對(duì)細(xì)菌的抑制作用
。
(5)竹類除了可制作酸筍外,具有很好的觀賞、經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值,某研究小組欲提取海濱植物紅樹(shù)細(xì)胞中的耐鹽堿基因M,將其轉(zhuǎn)入竹子細(xì)胞中,以獲得高產(chǎn)耐鹽堿品種。提取紅樹(shù)的總RNA后,經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
獲得cDNA后,可用PCR技術(shù)擴(kuò)增。在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,引物在 退火/復(fù)性
退火/復(fù)性
階段與模板結(jié)合后,TaqDNA聚合酶在適宜溫度(約72℃)下,將核苷酸連接到2個(gè)引物的 3’
3’
端(填3′或5′)
(6)轉(zhuǎn)入重組DNA分子的竹子愈傷組織經(jīng) 再分化
再分化
可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出 根和芽
根和芽
,直接發(fā)育形成再生植株。