蚊蟲分布范圍廣，生物量大，其中的雌蚊會叮咬人類，可傳播多種傳染病，須采取防控措施防止傳病蚊種泛濫。研究者利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)和同源重組修復技術提高蚊蟲群體中雄蚊比例。
（1）CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以實現(xiàn)對雙鏈DNA的精確切割，由三部分組成：crRNA、tracrRNA及Cas9蛋白，如圖1。crRNA會與tracrRNA結合形成sgRNA，sgRNA通過

堿基互補配對

堿基互補配對

與目標DNA結合，引導Cas9蛋白對DNA進行切割，導致其斷裂。

（2）同源重組修復是一種高保真的DNA雙鏈斷裂、修復技術，原理如圖2，其過程為CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)切割使DNA斷裂后，啟動同源修復，使得染色體DNA上的靶向序列被替換成所需序列。
①現(xiàn)需構建基因表達載體，請結合圖2選出目的基因中必要的結構或基因

BD

BD

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A.限定在體細胞內(nèi)表達的啟動子
B.限定在生殖細胞內(nèi)表達的啟動子
C.限定在受精卵內(nèi)表達的啟動子
D.I-Ppol基因（能夠切割X染色體DNA的核酸酶基因）
E.氨芐青霉素抗性基因
②通過

顯微注射

顯微注射

技術將基因表達載體導入受精卵，該受精卵發(fā)育成

雄

雄

性蚊蟲。Cas9蛋白將對應的靶向序列進行切割，以基因表達載體中同源序列間的DNA為模板進行修復，最終實現(xiàn)子代都繼承相應基因，使群體中雄蚊比例升高。
（3）除利用轉基因滅蚊之外，還存在寄生菌滅蚊技術，當雄蚊被沃爾巴克菌感染后，精子會被細菌產(chǎn)生的毒素污染。健康雌蚊的卵細胞與這些“毒精子”相遇后，產(chǎn)生細胞質不相容效應，導致后代無法正常發(fā)育。相對于寄生菌滅蚊，利用轉基因滅蚊的優(yōu)勢有

避免引入致病菌，減少污染；能穩(wěn)定遺傳，釋放少量蚊蟲即可起到控制作用；能夠持續(xù)起作用；

避免引入致病菌，減少污染；能穩(wěn)定遺傳，釋放少量蚊蟲即可起到控制作用；能夠持續(xù)起作用；

（答出兩點）。
（4）目前我國尚不允許釋放轉基因蚊蟲，請解釋原因

降低生物多樣性；基因逃逸或者基因擴散引發(fā)環(huán)境問題等

降低生物多樣性；基因逃逸或者基因擴散引發(fā)環(huán)境問題等

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