下表是幾種限制酶的識別序列及其切割位點(diǎn)，圖 1、圖 2 中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題。
| 限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
| 識別序 列及切割位點(diǎn) |
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BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
這 2 種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過 DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質(zhì)粒。（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
，平板上長出的菌落，常用PCR 鑒定，所用的引物組成為圖 2 中的 引物甲
引物甲
和 引物丙
引物丙
。（3）若 BamHⅠ酶切的DNA 末端與 BclⅠ酶切的DNA 末端連接，連接部位的 6 個(gè)堿基對序列為
（或
）（或）都不能
都不能
（填“都能”“都不能”或“只有一種能”） 切開。（4）若用 Sau3AⅠ切割圖 1 質(zhì)粒，最多可獲得
7
7
種大小不同的DNA 片段。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BclⅠ和HindⅢ；DNA連接；四環(huán)素；引物甲；引物丙；（或）；都不能；7
（或）；都不能；7【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：1難度：0.6
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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