生物工程
近年來，生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁澹ú僮鬟^程如圖），獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻，并利用地?zé)釓U水培養(yǎng)，不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地?zé)釓U水。
表1限制酶及其識(shí)別序列
| 限制酶 | 識(shí)別序列 |
| BamHⅠ | 5’-G↓GATCC-3’ 3’-CCTAG↑G-5’ |
| HindⅢ | 5’-A↓AGCTT-3’ 3’-TTCGA↑A-5’ |
| EcoRⅠ | 5’-G↓AATTC-3’ 3’-CTTAA↑G-5’ |
| XbaⅠ | 5’-T↓CTAGA-3’ 3’-AGATC↑T-5’ |
（1）提取紫蘇細(xì)胞的總RNA經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
得到的cDNA，經(jīng) PCR
PCR
技術(shù)擴(kuò)增得到DGAT1基因，與克隆質(zhì)粒pMD19連接，將連接產(chǎn)物導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2處理后的大腸桿菌細(xì)胞，并接種到添加 氨芐青霉素和X-gal
氨芐青霉素和X-gal
的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，挑選顏色為 白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。（2）用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接得到
基因表達(dá)載體（或基因重組）
基因表達(dá)載體（或基因重組）
，并導(dǎo)入到四尾柵藻。若DGAT1基因序列兩端沒有限制酶識(shí)別序列需要人工添加黏性末端，請(qǐng)根據(jù)表1中信息寫出DGAT1基因兩端所添加脫氧核苷酸的堿基順序使得目的基因左右側(cè)分別與質(zhì)粒上的BamHⅠ、XbaⅠ酶切末端相連。（3）DGAT1基因轉(zhuǎn)基因四尾柵藻成功的標(biāo)志是
四尾柵藻可以生成油脂
四尾柵藻可以生成油脂
。研究人員利用地?zé)釓U水培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻并檢測(cè)其油脂含量，結(jié)果如圖2。結(jié)果顯示：
轉(zhuǎn)DGAT1基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組
轉(zhuǎn)DGAT1基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組
。（4）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對(duì)地?zé)釓U水的去污能力，研究人員設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2。
表2培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
| 各項(xiàng)指標(biāo) | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
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。（多選）A.應(yīng)添加對(duì)照組：相同廢水培養(yǎng)基培養(yǎng)等量非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻（其余條件相同）
B.應(yīng)添加對(duì)照組：相同正常培養(yǎng)基培養(yǎng)等量非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻（其余條件相同）
C.應(yīng)添加對(duì)照組：相同正常培養(yǎng)基培養(yǎng)等量轉(zhuǎn)基因四尾柵藻（其余條件相同）
D.11天后檢測(cè)對(duì)照組總氮、總磷和氟化物的含量
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；PCR；氨芐青霉素和X-gal；白色；基因表達(dá)載體（或基因重組）；四尾柵藻可以生成油脂；轉(zhuǎn)DGAT1基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組；AD
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/11/24 21:0:1組卷：13引用：5難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
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