基因編輯與生物技術(shù)
CRISPR-cas技術(shù)又稱為基因編輯技術(shù)，其原理是由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。CRISPR-cas9系統(tǒng)廣泛存在于細(xì)菌體內(nèi)，是基于細(xì)菌的一種獲得性免疫系統(tǒng)改造而成、可以定向切割外源DNA。如圖1表示基因編輯技術(shù)的簡單示意圖。

（1）細(xì)菌中與 CRISPR-cas9系統(tǒng)在物質(zhì)組成上最相似的結(jié)構(gòu)是

核糖體

核糖體

。
（2）該系統(tǒng)使細(xì)菌獲得抵抗

A

A

的能力。
A.噬菌體
B.抗體
C.抗生素
D.溶菌酶
（3）PAM序列是一個NG序列（N可以是任何堿基），能被 CRISPR-cas9系統(tǒng)識別，并在該序列附近有酶切位點(diǎn)，請分析其互補(bǔ)鏈上的堿基序列可以是

BC

BC

（多選）。
A.TGG
B.CCC
C.GCC
D.AG
（4）以下關(guān)于 CRISPR-cas9系統(tǒng)和限制酶功能說法正確的是

ABD

ABD

（多選）。
A.都具有特異性
B.不能作用于磷酸和脫氧核糖之間的化學(xué)鍵
C.都能切割RNA單鏈
D.都需要和DNA連接酶配合使用，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因
科學(xué)家同時利用兩組 CRISPR-cas9系統(tǒng)，使目的基因兩端的DNA雙鏈斷裂，再將目的基因兩側(cè)的DNA片段連接起來，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞中目標(biāo)基因的敲除，如圖2。2019年中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用該技術(shù)處理獼猴胚胎后，獲得了世界首例核心節(jié)律基因BMAL1敲除的獼猴。

（5）請從分子水平上列舉兩個BAML1基因敲除獼猴與正常獼猴的差別：

BMAL1基因、RNA、蛋白質(zhì)等不同

BMAL1基因、RNA、蛋白質(zhì)等不同

。
（6）分別從基因波除獼猴的手臂肌肉組織和生殖腺組織中提取DNA進(jìn)行基因檢測，結(jié)果顯示其手臂肌肉組織DNA中未檢出BMAL因而在生殖腺組織DNA中檢出BMAL1基因。欲培養(yǎng)全身細(xì)胞中的BMAL基因均被敲除的獼猴，請簡述可采用的技術(shù)手段是

取基因敲除獼猴手臂肌肉組織細(xì)胞的細(xì)胞核；移植至正常獼猴的去核卵細(xì)胞中；利用克隆技術(shù)或細(xì)胞核移植技術(shù)；培養(yǎng)全身細(xì)胞BMAL1基因均被敲除的獼猴

取基因敲除獼猴手臂肌肉組織細(xì)胞的細(xì)胞核；移植至正常獼猴的去核卵細(xì)胞中；利用克隆技術(shù)或細(xì)胞核移植技術(shù)；培養(yǎng)全身細(xì)胞BMAL1基因均被敲除的獼猴

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