11.M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?,F(xiàn)設計實驗,將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A,流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶是
;常用
方法將重組質(zhì)粒導入成纖維細胞。
(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時,需要定期更換培養(yǎng)液,目的是
,在培養(yǎng)過程中細胞往往會貼壁生長這種現(xiàn)象稱為
。
(3)胚胎移植時的早期胚胎一般選
期的胚胎;移植后一般不會發(fā)生免疫排斥反應,原因是
。
(4)以免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合,誘導融合的方法是
(答出一點即可)。篩選融合雜種細胞,制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路
。