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利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白,近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1是基因工程常用的一種質(zhì)粒;圖2是利用該質(zhì)粒構(gòu)建的一種基因表達(dá)載體。各限制酶質(zhì)粒上分別只有一處識別序列,將質(zhì)粒和重組質(zhì)粒用相應(yīng)的限制酶酶切后,得到的DNA片段長度如表中數(shù)據(jù)。請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
質(zhì)粒 重組質(zhì)粒
BglⅡ 6.0kb 7.1kb
ClaⅠ 6.0kb 2.3kb,4.8kb
PstⅠ 6.0kb 1.5kb,5.6kb
(1)在基因工程中作為載體的質(zhì)粒應(yīng)具備的基本條件有
在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個至多個限制酶切割位點
在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個至多個限制酶切割位點
,而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有
啟動子和終止子
啟動子和終止子
。
(2)為了獲得更多的目的基因,可用PCR擴增,PCR的原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。PCR反應(yīng)體系中加入dNTP后,這些物質(zhì)既可以作為
原料
原料
,也可以為反應(yīng)提供
能量
能量
。
(3)PCR中通常會得到不同的DNA產(chǎn)物,常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
法鑒定,不同DNA片段因
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
等不同,在電場中的遷移速率也不同,因而可以形成不同條帶。
(4)已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb,則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為
1.6
1.6
kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb(如圖1所示),結(jié)合圖2分析,目的基因上ClaⅠ、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為
a和b
a和b
(在a、b兩點中選填)。
(5)培養(yǎng)受體菌時,在培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量的
氨芐青霉素
氨芐青霉素
,可以將導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都篩選出來。

【答案】在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個至多個限制酶切割位點;啟動子和終止子;DNA的半保留復(fù)制;原料;能量;瓊脂糖凝膠電泳;相對分子質(zhì)量、所帶電荷;1.6;a和b;氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:23引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進行了一系列實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進行了檢測,相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實驗結(jié)果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 2.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/11/3 12:0:2組卷:3引用:1難度:0.7
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