孔雀石綠（簡稱MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。

（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加

孔雀石綠（MG）

孔雀石綠（MG）

作為唯一碳源。配制好的培養(yǎng)基，需用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進(jìn)行滅菌。
（2）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

，用該方法統(tǒng)計(jì)樣品的菌落數(shù)目比活菌的實(shí)際數(shù)目

少

少

（“少”或“多”），原因是

當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

。實(shí)驗(yàn)室采用此方法，將1mL樣品稀釋1000倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為150、158和160。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為

1.56×10⁹

1.56×10⁹

個(gè)。
（3）MG高效降解菌株的鑒定：將純化獲得的菌種接種于含過量MG的固體培養(yǎng)基（其他營養(yǎng)成分等適宜）上，根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn)

透明圈

透明圈

就可以鑒別出目的菌株，原因是

目的菌株通過降解MG生長，使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈

目的菌株通過降解MG生長，使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈

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