枯草桿菌蛋白酶廣泛用于洗滌、制革、食品以及醫(yī)療等行業(yè)中。某研究小組利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)提高了枯草桿菌蛋白酶的催化活性。
回答下列問(wèn)題:
(1)蛋白質(zhì)工程是指通過(guò)基因修飾基因修飾或基因合成基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。
(2)目的基因的獲得是利用基因工程改造蛋白質(zhì)的第一步,目前常用的獲取目的基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成人工合成。
(3)為使目的基因與質(zhì)粒連接,通常會(huì)用兩種不同的限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)質(zhì)粒和目的基因兩側(cè)進(jìn)行切割,其目的是避免質(zhì)粒的自我連接、目的基因的自我連接,確保目的基因的插入方向避免質(zhì)粒的自我連接、目的基因的自我連接,確保目的基因的插入方向。再用DNA連接酶DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。
(4)研究小組將該蛋白酶中第188位丙氨酸替換為脯氨酸、第239位谷氨酰胺替換為精氨酸、第262位纈氨酸替換為亮氨酸,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該酶的催化活性大幅度提高。其原因可能是改變了蛋白酶的空間結(jié)構(gòu),提高了酶與底物的親和力改變了蛋白酶的空間結(jié)構(gòu),提高了酶與底物的親和力。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】基因修飾;基因合成;從基因文庫(kù)中獲??;利用PCR技術(shù)擴(kuò)增;人工合成;限制性核酸內(nèi)切酶;避免質(zhì)粒的自我連接、目的基因的自我連接,確保目的基因的插入方向;DNA連接酶;改變了蛋白酶的空間結(jié)構(gòu),提高了酶與底物的親和力
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:19引用:2難度:0.8
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