第一代DNA測(cè)序技術(shù)是由桑格等科學(xué)家發(fā)明的，又稱為鏈終止法測(cè)序，科學(xué)家用該技術(shù)測(cè)定了噬菌體X174的基因組序列，操作流程如圖所示，回答下列問(wèn)題：
（1）將碎片化的DNA片段連接到質(zhì)粒載體中，需要用到 限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶DNA連接酶等工具酶。
（2）為保證放射自顯影觀察條帶，應(yīng)選用 32P32P（填“18O”或“32P”）標(biāo)記ddNTP。
（3）在凝膠電泳中DNA分子的遷移速率與DNA分子的 DNA分子的大小和構(gòu)象DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度凝膠的濃度有關(guān)。
（4）ddNTP法循環(huán)測(cè)序中，用到PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA的半保留復(fù)制DNA的半保留復(fù)制，加入ddNTP會(huì)使PCR反應(yīng)終止的原因可能是 連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】限制性內(nèi)切酶；DNA連接酶；32P；DNA分子的大小和構(gòu)象；凝膠的濃度；DNA的半保留復(fù)制；連接到子鏈末端的ddNTP不能再與其它脫氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯鍵，導(dǎo)致ddNTP一旦連接到子鏈末端，子鏈便停止延伸
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過(guò)程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個(gè)引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為?？蒲腥藛T通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。梢垣@得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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