試卷征集
加入會(huì)員
操作視頻

如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)，請(qǐng)回答以下問題。
菁優(yōu)網(wǎng)
限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindlⅢ SacⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C
（1）若目的基因?yàn)榭瓜x基因，需要在連接Ti質(zhì)粒前進(jìn)行PCR擴(kuò)增，需要在樣本中再加入
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
，一般要經(jīng)歷多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為
變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。擴(kuò)增后切割目的基因，應(yīng)使用表中的限制酶是
EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
，這樣做的原因是
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
。
（2）若目的基因?yàn)橐葝u素基因，科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體，tetr為四環(huán)素抗性基因，ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)的目的是
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
。圖2中的啟動(dòng)子上有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，從而驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后，將其涂布于含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）；變性、復(fù)性、延伸；EcoRI和SacI；可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）；DNA連接酶和限制酶；使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增；RNA聚合酶；氨芐青霉素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：5難度：0.5
相似題

  • 1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中，進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達(dá)載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動(dòng)子、
     
    （答出3種）等結(jié)構(gòu)。
    （3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測(cè)，相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測(cè)方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
     
    。
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    ① ② ③
    轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測(cè)    		 有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對(duì)照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 菁優(yōu)網(wǎng)2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     
    。
    （3）導(dǎo)入目的基因時(shí)，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測(cè)受體細(xì)胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測(cè)方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者：深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司 | 應(yīng)用名稱：菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本：4.8.2  |  隱私協(xié)議      第三方SDK     用戶服務(wù)條款廣播電視節(jié)目制作經(jīng)營許可證出版物經(jīng)營許可證網(wǎng)站地圖本網(wǎng)部分資源來源于會(huì)員上傳，除本網(wǎng)組織的資源外，版權(quán)歸原作者所有，如有侵犯版權(quán)，請(qǐng)立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù)，本網(wǎng)將在三個(gè)工作日內(nèi)改正