如圖1表示某生物DNA結構的一部分及限制酶的識別序列和酶切位點,請回答以下問題。
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限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindlⅢ | SacⅠ |
識別序列和切割位點 | G↓AATTC | G↓GATCC | A↓AGCTT | GAGCT↓C |
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
,一般要經歷多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為 變性、復性、延伸
變性、復性、延伸
三步。擴增后切割目的基因,應使用表中的限制酶是 EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
,這樣做的原因是 可以防止目的基因和Ti質粒自身環(huán)化(保證Ti質粒與目的基因的正確連接)
可以防止目的基因和Ti質粒自身環(huán)化(保證Ti質粒與目的基因的正確連接)
。(2)若目的基因為胰島素基因,科研人員構建了如圖2所示的重組載體,tetr為四環(huán)素抗性基因,ampr為氨芐青霉素抗性基因。構建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質粒上插入大腸桿菌復制原點的目的是 使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增
使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增
。圖2中的啟動子上有 RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識別和結合位點,從而驅動基因的轉錄。將重組載體導入大腸桿菌體內后,將其涂布于含 氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶);變性、復性、延伸;EcoRI和SacI;可以防止目的基因和Ti質粒自身環(huán)化(保證Ti質粒與目的基因的正確連接);DNA連接酶和限制酶;使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增;RNA聚合酶;氨芐青霉素
【解答】
【點評】
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