某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Tet^r表示四環(huán)素抗性基因）。有人給此質(zhì)粒載體加上基因表達(dá)所需的結(jié)構(gòu)，再用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是

二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng)

二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng)

；并且

含有質(zhì)粒載體

含有質(zhì)粒載體

和

含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒（或答含有重組質(zhì)粒）

含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒（或答含有重組質(zhì)粒）

的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是

二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)

二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)

。
在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有

四環(huán)素

四環(huán)素

的固體培養(yǎng)基。
（2）篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)只有部分大腸桿菌能表達(dá)基因產(chǎn)物，不能表達(dá)的原因是

目的基因與質(zhì)粒反向連接

目的基因與質(zhì)粒反向連接

。
（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于

受體細(xì)胞

受體細(xì)胞

。