HI8L是宮頸癌病毒（一種DNA病毒）特有的蛋白?？蒲腥藛T利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)在植物細(xì)胞中表達(dá)H18L用于研究。研究發(fā)現(xiàn)，不同植物翻譯時(shí)會(huì)有偏好的密碼子，若提高H18L基因中編碼受體細(xì)胞偏好的密碼子序列比例，將大幅度提高翻譯效率。為實(shí)現(xiàn)上述目的，需要對H18L基因序列進(jìn)行改造。原理如圖所示。
步驟一：

步驟二：

回答下列問題：
（1）步驟一：將預(yù)期的堿基序列設(shè)計(jì)在PCR的引物中，制備出PCR“體系1”和“體系2”，分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
①補(bǔ)全下表中的兩個(gè)PCR體系的成分。

成分	PCR體系1	PCR體系2
模板	H18L基因 H18L基因
引物	a和b	c和d
酶	耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶） 耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）
其他成分	四種脫氧核苷酸、	緩沖液等

②PCR擴(kuò)增時(shí)，引物b、c與體系中加入的模板

部分結(jié)合

部分結(jié)合

（填“完全結(jié)合”或“部分結(jié)合”）。
（2）步驟二：將體系1、2的產(chǎn)物（即圖中的ef和gh）混合后，繼續(xù)進(jìn)行下一次PCR反應(yīng)。在該P(yáng)CR反應(yīng)體系中經(jīng)過高溫變性后，當(dāng)溫度下降到50℃，能夠互補(bǔ)配對的DNA鏈相互結(jié)合，理論上有

4

4

種結(jié)合的可能，其中能進(jìn)行進(jìn)一步延伸的有

1

1

種。
（3）步驟二的最終產(chǎn)物即為優(yōu)化后的H18L基因序列，其長度為

942

942

bp。用

BamHⅠ和Xhol

BamHⅠ和Xhol

限制酶處理該序列和載體，構(gòu)建表達(dá)載體。再用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法將該載體轉(zhuǎn)人植物的愈傷組織，生產(chǎn)H18L蛋白。
（4）上述實(shí)驗(yàn)中，利用引物設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)了哪些實(shí)驗(yàn)?zāi)康模浚ㄕ垖懗鰞蓷l）