β-丙氨酸不僅是一種醫(yī)藥中間體,還可以作為食品添加劑,改善食物味道,提高產品質量。可運用構建L-天冬氨酸α-脫羧酶大腸桿菌的方式生產該氨基酸,制備工程菌的示意圖如圖所示,回答下列問題:
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(1)構建工程菌主要需要四個步驟:目的基因的獲取目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定。
(2)構建成功的C除含有目的基因外,還應含有 啟動子、終止子、標記基因啟動子、終止子、標記基因(答出三點即可)。該過程分別對質粒和含目的基因的片段進行雙酶切,雙酶切的優(yōu)點是 防止質粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接防止質粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接。
(3)為了確定工程菌中的L-天冬氨酸α-脫羧酶基因是否轉錄,可用同位素或熒光標記的 L—天冬氨酸α—脫羧酶基因單鏈L—天冬氨酸α—脫羧酶基因單鏈作探針進行分子雜交檢測。
(4)若要通過基因工程的方法探究L-天冬氨酸α-脫羧酶基因能否在酵母菌中表達,實驗思路是 將L—天冬氨酸α—脫羧酶基因轉入酵母菌,檢測酵母菌中β—丙氨酸的含量將L—天冬氨酸α—脫羧酶基因轉入酵母菌,檢測酵母菌中β—丙氨酸的含量。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】目的基因的獲取;將目的基因導入受體細胞;啟動子、終止子、標記基因;防止質粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接;L—天冬氨酸α—脫羧酶基因單鏈;將L—天冬氨酸α—脫羧酶基因轉入酵母菌,檢測酵母菌中β—丙氨酸的含量
【解答】
【點評】
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