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花青素是一類水溶性色素,其在花瓣中含量的增高或降低都可能改變花的顏色。在野生紫色矮牽牛中花青素的合成過程受查爾酮合酶(CHSA)催化,科研人員用基因工程技術(shù)研究了查爾酮合酶基因(chsA基因)轉(zhuǎn)入野生紫色矮牽牛后對花色的影響。
(1)利用chsA基因與載體質(zhì)粒(含T-DNA)構(gòu)建重組質(zhì)粒。
①將重組質(zhì)粒先轉(zhuǎn)入
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
細(xì)胞中,用此細(xì)胞侵染葉片細(xì)胞,培養(yǎng)誘導(dǎo)成為愈傷組織,進(jìn)而獲得轉(zhuǎn)基因矮牽牛植株。
②重組質(zhì)粒中T-DNA所含序列如圖1所示。NptⅡ基因表達(dá)的蛋白,可以將ATP中的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到物質(zhì)K上。

在①過程獲得的愈傷組織細(xì)胞提取液中,加入物質(zhì)K和用32P標(biāo)記的
ATP
ATP
,檢測生成物,用于判斷
T-DNA是否導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞中
T-DNA是否導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞中

(2)野生紫色矮牽牛自身chaA基因只在花冠組織中表達(dá),花苞時、開花后均表達(dá)。轉(zhuǎn)基因矮牽牛的花色為白色。
①uidA表達(dá)產(chǎn)物可以使物質(zhì)X呈現(xiàn)藍(lán)色,進(jìn)而使植物組織或器官呈現(xiàn)藍(lán)色。開花前檢測用物質(zhì)X處理的轉(zhuǎn)基因矮牽?;ò?、葉等組織,均呈現(xiàn)藍(lán)色。制備轉(zhuǎn)基因矮牽牛時,轉(zhuǎn)入chsA-uidA融合基因,并非只轉(zhuǎn)入chsA基因,目的是
用uidA表達(dá)產(chǎn)物顯示轉(zhuǎn)入的chsA基因的表達(dá)位置(組織或器官)和時間
用uidA表達(dá)產(chǎn)物顯示轉(zhuǎn)入的chsA基因的表達(dá)位置(組織或器官)和時間
。
②檢測野生紫色矮牽牛和轉(zhuǎn)基因矮牽牛的不同組織chaA基因的mRNA含量,結(jié)果如圖2。
由實驗結(jié)果推測,轉(zhuǎn)基因矮牽牛中,其自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因的表達(dá)時間及功能關(guān)系是
自身chsA基因只在花苞的花冠組織中表達(dá);花開放前,轉(zhuǎn)入的chsA基因在所有植物組織(花冠、葉)中均表達(dá)。開花后,自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá)
自身chsA基因只在花苞的花冠組織中表達(dá);花開放前,轉(zhuǎn)入的chsA基因在所有植物組織(花冠、葉)中均表達(dá)。開花后,自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá)
。
(3)結(jié)合文中信息,解釋轉(zhuǎn)基因矮牽牛出現(xiàn)白花的原因。
因自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá),使得查爾酮合酶不合成或合成量極少,在花苞時難以催化花青素的合成(或花青素合成極少),導(dǎo)致白花
因自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá),使得查爾酮合酶不合成或合成量極少,在花苞時難以催化花青素的合成(或花青素合成極少),導(dǎo)致白花
。

【答案】農(nóng)桿菌;ATP;T-DNA是否導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞中;用uidA表達(dá)產(chǎn)物顯示轉(zhuǎn)入的chsA基因的表達(dá)位置(組織或器官)和時間;自身chsA基因只在花苞的花冠組織中表達(dá);花開放前,轉(zhuǎn)入的chsA基因在所有植物組織(花冠、葉)中均表達(dá)。開花后,自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá);因自身chsA基因與轉(zhuǎn)入的chsA基因彼此抑制表達(dá),使得查爾酮合酶不合成或合成量極少,在花苞時難以催化花青素的合成(或花青素合成極少),導(dǎo)致白花
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/15 8:0:9組卷:18引用:1難度:0.4
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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