當?shù)貢r間2022年1月7日，馬里蘭大學醫(yī)學院團隊表示對一名患有晚期心臟病的57歲男子實施了全球首例豬心臟移植手術(shù)。事實上，這顆豬心臟并非完全是傳統(tǒng)意義上的豬的心臟，而是經(jīng)過了基因編輯的心臟。馬里蘭大學醫(yī)學中心表示，他們在供體豬中進行了10個獨特的基因編輯——敲掉了3個會引發(fā)免疫排斥反應的豬的基因和1個會導致心臟組織過度生長的豬的基因，并插入了6個來自人類的基因。用重組DNA技術(shù)可以賦予豬新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制酶的切割位點如圖所示：
常用的DNA連接酶有E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中 EcoRI或PstⅠEcoRI或PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E?coliDNA連接酶連接。上圖中 EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRVEcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（2）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細胞中能 自我復制自我復制；質(zhì)粒DNA分子上有 限制酶切割位點限制酶切割位點，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標記基因，如某種抗生素抗性基因，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是 將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞。
（3）如果要在短時間內(nèi)獲得較多的目的基因，通常采用 PCRPCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制。在操作步驟中需要加熱至90～95℃使 含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈，然后降溫至55～65℃，其目的是 使引物和模板鏈結(jié)合使引物和模板鏈結(jié)合。
（4）如果檢測發(fā)現(xiàn)目的基因隨質(zhì)粒被成功導入了受體細胞，但卻沒有檢測到目的基因相對應的蛋白質(zhì)，應考慮位于目的基因首端的 啟動子啟動子和末端的 終止子終止子是否設(shè)計好，并從這方面進行改善。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRI或PstⅠ；EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV；磷酸二酯鍵；自我復制；限制酶切割位點；將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞；PCR；DNA半保留復制；含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈；使引物和模板鏈結(jié)合；啟動子；終止子
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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