黃萎病是一種危害棉花的常見(jiàn)疾病，科學(xué)工作者通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將抗黃萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）導(dǎo)入棉花，獲得抗黃萎病棉花。下圖為構(gòu)建的重組質(zhì)粒的示意圖，已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不能表達(dá)，而在植物細(xì)胞中能表達(dá)?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，利用 限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶將GO定向接入Ti質(zhì)粒。Ti質(zhì)粒上nptII的功能是 作為標(biāo)記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞作為標(biāo)記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。
（2）在如圖所示重組質(zhì)粒中，目的基因的啟動(dòng)子和終止子應(yīng)位于 GO的兩端GO的兩端（填“Bar的兩端”或“GO的兩端”或“Bar-GO的兩端”）。啟動(dòng)子具有 驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA的作用。
（3）切取經(jīng)無(wú)菌培養(yǎng)的棉花幼苗下胚軸，直接轉(zhuǎn)入含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌培養(yǎng)液中侵染5～10 min后，將下胚軸放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。成功轉(zhuǎn)化的棉花細(xì)胞能在含有 草丁膦草丁膦的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)增殖，未成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞不能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)增殖。為了檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉花是否含有葡萄糖氧化酶，可采用 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè)。
（4）若將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞，一般采用的方法是 顯微注射法顯微注射法。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接；作為標(biāo)記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞；GO的兩端；驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA；草丁膦；抗原一抗體雜交；顯微注射法
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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