黃萎病是一種危害棉花的常見疾病，科學(xué)工作者通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將抗黃萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）導(dǎo)入棉花，獲得抗黃萎病棉花。下圖為構(gòu)建的重組質(zhì)粒的示意圖，已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不能表達，而在植物細胞中能表達?；卮鹣铝袉栴}：
（1）構(gòu)建基因表達載體時，利用 限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶將GO定向接入Ti質(zhì)粒。Ti質(zhì)粒上nptII的功能是 作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細胞作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細胞。
（2）在如圖所示重組質(zhì)粒中，目的基因的啟動子和終止子應(yīng)位于 GO的兩端GO的兩端（填“Bar的兩端”或“GO的兩端”或“Bar-GO的兩端”）。啟動子具有 驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA的作用。
（3）切取經(jīng)無菌培養(yǎng)的棉花幼苗下胚軸，直接轉(zhuǎn)入含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌培養(yǎng)液中侵染5～10 min后，將下胚軸放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。成功轉(zhuǎn)化的棉花細胞能在含有 草丁膦草丁膦的培養(yǎng)基中生長增殖，未成功轉(zhuǎn)化的細胞不能在該培養(yǎng)基中生長增殖。為了檢測轉(zhuǎn)基因棉花是否含有葡萄糖氧化酶，可采用 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交法進行檢測。
（4）若將目的基因?qū)雱游锛毎?，一般采用的方法?顯微注射法顯微注射法。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接；作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質(zhì)粒的受體細胞；GO的兩端；驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄合成mRNA；草丁膦；抗原一抗體雜交；顯微注射法
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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