為培育含油量高的油菜,研究人員嘗試?yán)没蚬こ痰燃夹g(shù)獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種?;卮饐?wèn)題:
(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物,采用PCR技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶D基因,從擬南芥基因中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因,所含限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的酶切位點(diǎn)如圖甲所示。
若用ClaⅠClaⅠ和DNA連接DNA連接酶處理酶D基因和轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因后,可得到A端與DD端(填圖中字母)相連的重組基因。
(2)將上述重組基因進(jìn)一步處理,插入圖乙所示T質(zhì)粒的T-DNA中,T-DNA上有SacⅠ、XbaⅠSacⅠ、XbaⅠ限制酶切位點(diǎn),構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到含重組基因的單菌落,再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間,此過(guò)程的目的是利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞,進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞,該細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù),可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株,其主要原理是植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】ClaⅠ;DNA連接;D;SacⅠ、XbaⅠ;基因表達(dá)載體;四環(huán)素;利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞;植物組織培養(yǎng);植物細(xì)胞的全能性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:1難度:0.7
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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