除草劑的有效成分草甘膦能夠專一的抑制EPSP合成酶的活性，從而使植物體內多種代謝途徑受到影響而死亡。草甘膦起作用時沒有選擇性，它在除掉雜草的同時也會使作物受損。解決這個問題的有效方法是培育抗草甘膦作物。如圖是培育抗草甘膦棉的流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）PCR擴增是獲取和擴增目的基因的常用方法，該方法的基本原理是

DNA雙鏈復制

DNA雙鏈復制

，擴增過程中新形成的DNA單鏈的合成是

連續(xù)

連續(xù)

（填“連續(xù)”或“不連續(xù)”）的。
（2）培育過程中利用的限制酶必須滿足的基本條件是：

不破壞目的基因和質粒的結構；在Ti質粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點

不破壞目的基因和質粒的結構；在Ti質粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點

（答兩點）、目的基因兩側有該限制酶的識別位點。根據來源不同，可將基因工程中的DNA連接酶分為

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

兩大類。
（3）若圖中細菌X是農桿菌，導入重組基因表達載體前需先用CaCl₂處理，其目的是

使農桿菌處于感受態(tài)，容易從外界吸收DNA

使農桿菌處于感受態(tài)，容易從外界吸收DNA

，后將其接種到液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)10～12h,其目的是

擴大培養(yǎng)轉化的農桿菌

擴大培養(yǎng)轉化的農桿菌

。農桿菌細胞內的Ti質粒上的T-DNA能轉移到被侵染宿主細胞內，并整合到

宿主細胞的染色體DNA

宿主細胞的染色體DNA

上；處理Y能成功的原因是

植物細胞具有全能性

植物細胞具有全能性

。