B基因存在于水稻基因組中,僅在體細胞和精子中正常表達,在卵細胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響,設(shè)計了如圖實驗來獲取能夠在卵細胞中表達B基因的轉(zhuǎn)基因植株。
注:啟動子是指可在水稻卵細胞中啟動轉(zhuǎn)錄的啟動子:Luc基因表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光。
回答下列問題:
(1)啟動子是 RNA聚合RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位。題中的基因表達載體除了啟動子外,還必須有 目的基因、標記基因、終止子目的基因、標記基因、終止子(答出兩點即可)。
(2)為篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,培養(yǎng)基除了添加農(nóng)桿菌生長繁殖必需的成分和瓊脂外,還要添加 潮霉素和卡那霉素潮霉素和卡那霉素(答出兩點即可)。
(3)②過程利用了農(nóng)桿菌能感染水稻愈傷組織并且將Ti質(zhì)粒上的 T-DNAT-DNA轉(zhuǎn)移至水稻愈傷組織,并整合到水稻
細胞染色體上,這種方法稱為 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法除此之外,還可用 花粉管通道花粉管通道法把目的基因?qū)胫参锸荏w細胞中。
(4)鑒定和篩選表達B基因的轉(zhuǎn)基因植株的方法是 檢測加入熒光素的該植株卵細胞中是否發(fā)出熒光檢測加入熒光素的該植株卵細胞中是否發(fā)出熒光。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合;目的基因、標記基因、終止子;潮霉素和卡那霉素;T-DNA;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;花粉管通道;檢測加入熒光素的該植株卵細胞中是否發(fā)出熒光
【解答】
【點評】
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