雷帕霉素是一種新型酯類免疫抑制劑，研究者通過實(shí)驗(yàn)探究雷帕霉素對小鼠成肌細(xì)胞能量代謝的影響。
（1）

ATP

ATP

是驅(qū)動細(xì)胞生命活動的直接能源物質(zhì)，動物細(xì)胞中該物質(zhì)的能量來自

細(xì)胞呼吸

細(xì)胞呼吸

這一代謝過程，發(fā)生場所為

細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體

細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體

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（2）PGC-1、YY1和mTOR是細(xì)胞中調(diào)節(jié)線粒體基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子。研究人員用一定濃度的雷帕霉素處理小鼠成肌細(xì)胞，檢測轉(zhuǎn)錄因子PGC-1的mRNA相對含量和蛋白質(zhì)含量，如圖甲，結(jié)果顯示：

雷帕霉素降低了成肌細(xì)胞內(nèi)PGC-1基因的表達(dá)量

雷帕霉素降低了成肌細(xì)胞內(nèi)PGC-1基因的表達(dá)量

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（3）免疫共沉淀技術(shù)是在體外進(jìn)行的研究蛋白質(zhì)相互作用的一種技術(shù)。其原理是抗體A可與蛋白A特異性結(jié)合，因此使用抗體A可將蛋白A“沉淀”。如果蛋白B與蛋白A相互結(jié)合形成復(fù)合體，那么抗體A在將蛋白A“沉淀”的同時，也會把蛋白B“沉淀”下來。
①研究人員欲研究這三種轉(zhuǎn)錄因子（蛋白質(zhì)）之間的相互作用，利用免疫共沉淀技術(shù)檢測不同處理?xiàng)l件下，PGC-1、YY1、mTOR被YY1抗體“沉淀”的情況，結(jié)果如圖乙。實(shí)驗(yàn)中研究人員檢測各蛋白提取結(jié)果的目的是

保證雷帕霉素不會降解三種蛋白

保證雷帕霉素不會降解三種蛋白

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②根據(jù)圖乙結(jié)果，推測線粒體中雷帕霉素與被“沉淀”蛋白間存在互作模式。若要驗(yàn)證該互作模式，可繼續(xù)選擇

b

b

（a：mTOR；b：PGC-1；c：無關(guān)）（填序號）抗體進(jìn)行免疫共沉淀。若互作模式成立，請?jiān)趫D丙中相應(yīng)位置用“-”畫出可“沉淀”出的條帶。
（4）綜合上述實(shí)驗(yàn)，說明雷帕霉素對細(xì)胞能量代謝影響的分子機(jī)制是

雷帕霉素可抑制小鼠成肌細(xì)胞中PGC-1基因的表達(dá)，同時抑制小鼠成肌細(xì)胞線粒體中PGC-1蛋白與YY1-mTOR復(fù)合體的結(jié)合，從而進(jìn)一步抑制線粒體基因的表達(dá)

雷帕霉素可抑制小鼠成肌細(xì)胞中PGC-1基因的表達(dá)，同時抑制小鼠成肌細(xì)胞線粒體中PGC-1蛋白與YY1-mTOR復(fù)合體的結(jié)合，從而進(jìn)一步抑制線粒體基因的表達(dá)

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