回答下列基因工程的問題．100多年前，“疫苗之父”巴斯德開創(chuàng)了第一次疫苗革命，其特點是接種滅活或減毒的病原微生物．20世紀70年代開始，現代生物技術的迅猛發(fā)展開創(chuàng)了第二次疫苗革命，使疫苗的研制進入分子水平．圖一是1986年通過基因工程制備乙型肝炎表面抗原（HbsAg）從而獲得乙肝疫苗的過程．
在圖一中步驟①和③的過程中，需要用合適的限制酶切割乙肝表面抗原基因和質粒．現將乙肝表面抗原基因及質粒的部分限制酶的識別序列及位置表示為圖二．質粒中的啟動子是質粒中基因得以正常表達所必需的部分．lacZ基因合成某種酶，該酶能將無色染料X-gal變成藍色，最終能在無色染料X-gal的培養(yǎng)基上將含該基因的菌落染成藍色．
| 限制酶 | EcoR | BclⅠ | BamHⅠ | HindⅢ |
| 識別序列及切割位點 | G↓AATTC | T↓GATCA | G↓GATCC | A↓AGCTT |
BamHⅠ和HindⅢ
BamHⅠ和HindⅢ
，切割乙肝表面抗原基因選用的限制酶是BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
．（2）為篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細胞，需要將導入操作之后的大腸桿菌接種到含
氨芐青霉素和無色染料X-gal
氨芐青霉素和無色染料X-gal
的固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，挑選未被染上藍色的菌落
未被染上藍色的菌落
的菌落純化培養(yǎng)．（3）下列有關限制酶的敘述中，正確的是
CD
CD
（多選）A．限制酶催化的反應類型是氧化分解反應
B．限制酶破壞的是氫鍵
C．一種限制酶只能識別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核苷酸序列
D．EcoR酶與HindⅢ酶相比較，EcoR酶切割后DNA片段較容易分離
（4）在圖一中步驟④中，使用基因工程工具酶是
DNA連接酶
DNA連接酶
．一個乙肝表面抗原基因與一個質粒重組的過程中（圖一的步驟④），游離的磷酸基團數目減少4
4
個（5）通過基因工程生產的疫苗與滅活或減毒的病原微生物的疫苗，在安全性方面的比較結果及理由是
基因工程疫苗更安全，因為疫苗成分中只含病毒蛋白，不含病毒核酸，不會出現病毒侵染的情況
基因工程疫苗更安全，因為疫苗成分中只含病毒蛋白，不含病毒核酸，不會出現病毒侵染的情況
．【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ和HindⅢ；BclⅠ和HindⅢ；氨芐青霉素和無色染料X-gal；未被染上藍色的菌落；CD；DNA連接酶；4；基因工程疫苗更安全，因為疫苗成分中只含病毒蛋白，不含病毒核酸，不會出現病毒侵染的情況
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/23 20:38:36組卷：46引用：2難度：0.1
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6