幽門螺桿菌(Hp)是一種螺旋狀,微需氧的致病菌,對萬古霉素(抗生素)不敏感,對青霉素(抗生素)高度敏感,其危害主要是引起胃炎、胃潰瘍甚至胃癌等,體檢時可通過14C尿素呼氣試驗來檢測幽門螺桿菌的感染情況。研究人員利用消化道潰瘍患者胃活組織標本進行了Hp臨床菌株的分離和培養(yǎng),所用的培養(yǎng)基配方如下?;卮鹣铝袉栴}:
①制取心腦浸液瓊脂培養(yǎng)基:稱取23.5g心腦浸液溶解在500mL蒸餾水中,加入適量瓊脂煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘。取出自然冷卻至50℃,加入2mL幽門螺桿菌選擇劑(萬古霉素5mg,頭孢磺啶2.5mg,磺胺增效劑2.5mg、兩性霉素B2.5mg,溶于2mL無菌蒸餾水中),再加入35mL(7%)脫纖維羊血。
②制取心腦浸液液體培養(yǎng)基:稱取0.37g心腦浸液肉湯于50mL的小燒杯中,再加入10mL蒸餾水,用玻璃棒攪拌均勻。
(1)上述心腦浸液瓊脂培養(yǎng)基中,瓊脂的作用是作為
凝固劑
凝固劑
﹔心腦浸液液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是 擴增菌體(數(shù)量)
擴增菌體(數(shù)量)
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(2)對上述配制好的心腦浸液瓊脂培養(yǎng)基用 高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
法滅菌,采用平板劃線法純化培養(yǎng)得到單菌落。從第二次劃線操作起,每次總是要從上一次劃線的末端開始劃線,并劃線數(shù)次,其原因是 線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處少,細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少
線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處少,細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少
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(3)若要研究幽門螺桿菌的生長規(guī)律,可挑取單個菌落進行液體培養(yǎng),培養(yǎng)過程需設置好培養(yǎng)條件,搖床培養(yǎng)24小時,振蕩速度保持80~130r/min的目的是 提供需氧條件,使菌體與營養(yǎng)物質充分接觸
提供需氧條件,使菌體與營養(yǎng)物質充分接觸
。培養(yǎng)過程中為抑制雜菌的生長,培養(yǎng)液中需加入 萬古霉素
萬古霉素
(填“萬古霉素”或“青霉素”)。
(4)幽門螺桿菌能分解尿素形成氨和二氧化碳,受試者口服 14C
14C
標記的尿素膠囊后,檢測收集受試者呼出的CO2氣體,可作為診斷幽門螺桿菌的指標。醫(yī)院針對幽門螺桿菌的常用治療方案是連續(xù)服用青霉素2周,至放射性檢測陰性后停藥,其依據(jù)是 幽門螺桿菌對青霉素高度敏感,連續(xù)使用青霉素可有效抑制幽門螺桿菌生長,受試者呼出的氣體中沒有14CO2,說明幽門螺桿菌被清除
幽門螺桿菌對青霉素高度敏感,連續(xù)使用青霉素可有效抑制幽門螺桿菌生長,受試者呼出的氣體中沒有14CO2,說明幽門螺桿菌被清除
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