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人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由血纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。然而，為心?；颊咦⑸浯髣┝康幕蚬こ蘴-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與血纖維蛋白結(jié)合的特異性不高。研究證實，將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對天然的t-PA基因進行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該突變基因，可制造出性能優(yōu)異的t-PA突變蛋白。
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（1）制造該性能優(yōu)異t-PA突變蛋白的過程稱為
蛋白質(zhì)
蛋白質(zhì)
工程。
（2）高純度的DNA模板是成功擴增目的基因的前提條件之一，在制備DNA模板時，可以用高溫處理的方法去除蛋白質(zhì)，原因是
AC
AC
。
A．蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)容易破壞
B．氨基酸容易高溫脫氨基
C．DNA氫鍵容易斷裂和恢復(fù)
D．DNA和蛋白質(zhì)可以堿基配對
（3）已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈（作為模板指導(dǎo)RNA合成的鏈）序列為ACA，而絲氨酸的密碼子為UCU，因此突變基因編碼該氨基酸的模板鏈序列應(yīng)設(shè)計為
AGA
AGA
。
（4）若獲得的t-PA突變基因如圖所示，那么質(zhì)粒pCLY11需用限制酶
XmaI
XmaI
和
BglII
BglII
切開，才能與t-PA突變基因高效連接，在連接時需要用到
DNA連接
DNA連接
酶。
（5）應(yīng)選擇在加入新霉素的培養(yǎng)基中
不能
不能
（能/不能）生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，放在含新霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，選擇呈
白色
白色
色的菌落，進一步培養(yǎng)、檢測和鑒定，以選育能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。

【答案】蛋白質(zhì)；AC；AGA；XmaI；BglII；DNA連接；不能；白色
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/7/6 8:0:9組卷：8引用：2難度：0.6
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  • 1．運用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì)，對菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，據(jù)以上信息，下列敘述正確的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/7 11:0:1組卷：104引用：32難度：0.7

  • 菁優(yōu)網(wǎng)2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導(dǎo)入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細(xì)胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 3．在碳反應(yīng)中，RuBP羧化酶（R酶）可以催化CO2的固定，R酶由大亞基蛋白（L）和小亞基蛋白（S）組成。高等植物細(xì)胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成，S由細(xì)胞核基因編碼并在細(xì)胞溶膠中的核糖體合成后進入葉綠體，與L組裝成有功能的酶。研究發(fā)現(xiàn)，原核生物藍藻（藍細(xì)菌）R酶的活性高于高等植物。研究人員將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物（甲）的葉綠體DNA中，同時去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活生長。檢測結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。下列有關(guān)敘述正確的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/7 8:0:2組卷：5引用：1難度：0.5
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