人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑，其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為HSA基因兩側(cè)的核苷酸序列。圖三為相關(guān)限制酶的識別序列和切割位點。據(jù)圖回答下列問題：

（1）基因工程的核心步驟是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

，完成過程②所需要技術(shù)手段是

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

。
（2）采用PCR技術(shù)擴增HSA基因，根據(jù)其兩端序列，則需要設(shè)計的引物序列是

引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′，引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′

引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′，引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′

。
（3）依據(jù)圖一、圖二和圖三分析，成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到

2

2

個DNA片段。
（4）圖一過程①中需將植物細(xì)胞與

農(nóng)桿菌

農(nóng)桿菌

混合后共同培養(yǎng)，旨在讓

T-DNA

T-DNA

整合到植物細(xì)胞染色體DNA上，除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含

物質(zhì)K

物質(zhì)K

的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
（5）過程④前對卵細(xì)胞供體母牛進(jìn)行

超數(shù)排卵

超數(shù)排卵

處理。過程通常將受精卵培養(yǎng)至

桑葚胚或囊胚

桑葚胚或囊胚

階段。過程⑤鑒定胚胎性別時常取

滋養(yǎng)層

滋養(yǎng)層

細(xì)胞做DNA分析。
（6）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。