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干燥綜合征(SS)是臨床常見的一種自身免疫病,其血清中存在多種抗體,其中以SSB抗體特異性最強,影響最顯著。科研人員為建立抗SSB抗體全自動定量檢測的磁微?;瘜W發(fā)光試劑,利用基因工程技術(shù)獲得重組SSB蛋白,流程如下,請分析回答:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶。通過PCR技術(shù)擴增SSB基因的前提是要有
一段已知的SSB基因的核苷酸序列
一段已知的SSB基因的核苷酸序列
,以便合成引物。為與PET41a質(zhì)粒連接,獲得的目的基因A兩端要含有
BamHⅠ和XhoⅠ
BamHⅠ和XhoⅠ
酶切位點。
(2)獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后,進行如下實驗切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒,獲得片段大小如下表(1kb=1000堿基對)(注意:DNA片段大小與圖中所畫比例一致)
限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ和XhoⅠ
原質(zhì)粒 8.1kb 2.7kb、5.4kb
重組質(zhì)粒 3.4kb、5.0kb 未做該處理
分析數(shù)據(jù),計算可得SSB基因的長度為
3kb
3kb
。與人基因組文庫中的SSB基因相比,通過①過程獲得的SSB基因結(jié)構(gòu)特點是
沒有啟動子和內(nèi)含子
沒有啟動子和內(nèi)含子
。
(3)②過程目的是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到處于
感受態(tài)
感受態(tài)
的大腸桿菌內(nèi),并接種于添加
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上,收集菌落進行鑒定,將陽性菌落進一步純化后將菌體破碎處理,篩選得到重組SSB蛋白。
(4)為檢測重組質(zhì)粒表達情況及重組蛋白與抗體結(jié)合能力,科研人員用含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑連續(xù)三次免疫雌性小鼠,第三次免疫后第7天取小鼠血清并提取抗體并進行檢測,結(jié)果表明重組SSB蛋白具有與相應抗體高度結(jié)合的能力。對小鼠進行連續(xù)三次免疫的目的是
使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄;一段已知的SSB基因的核苷酸序列;BamHⅠ和XhoⅠ;3kb;沒有啟動子和內(nèi)含子;感受態(tài);卡那霉素;使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列,并運用交錯延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強的重組B基因,轉(zhuǎn)入煙草獲得成功,過程如圖所示。下列選項正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注:①交錯延伸PCR:基因Bt1和Bt2均作為模板,所需引物相同,圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段,可使植物細胞合成生長素。

    發(fā)布:2024/11/16 21:0:1組卷:36引用:2難度:0.5
  • 2.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 3.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應,嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
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