噬菌體展示技術(shù)是將外源目標(biāo)基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,使目標(biāo)蛋白被展示到噬菌體表面的生物技術(shù)(如圖所示)。被展示的蛋白質(zhì)可以保持相對(duì)獨(dú)立的空間結(jié)構(gòu)和生物活性,以利于靶分子的識(shí)別和結(jié)合。請(qǐng)分析回答:
(1)插入載體之前,目標(biāo)基因一般需經(jīng)PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增基因的原理是 DNA的半保留復(fù)制DNA的半保留復(fù)制。若目標(biāo)基因的核苷酸序列未知,但已知其臨近區(qū)域的上、下游的部分序列如下所示,請(qǐng)從表中所列引物中選出一對(duì)合適的引物用于目標(biāo)基因的PCR擴(kuò)增:乙和C乙和C。
5′-GACGCATTACGGTAAC??????TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG??????AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ | 引物Ⅱ | ||
甲 | 5′-CTGCGTAATGCCATTG | A | 5′-AGGTCGAATCGTCATT |
乙 | 5′-GACGCATTACGGTAAC | B | 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA |
丙 | 5′-GTTACCGTAATGCGTC | C | 5′-TTACTGCTAAGCTGGA |
丁 | 5′-CAATGGCATTACGCAG | D | 5′-AATGACGATTCGACCT |
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
;建立噬菌體展示庫(kù)需用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。(3)目標(biāo)蛋白的篩選利用了
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
方法,其原理是 抗體的結(jié)合具有特異性
抗體的結(jié)合具有特異性
。(4)擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí),進(jìn)行誘變處理的目的可能是通過(guò)提高某些基因的突變率而獲取
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
;根據(jù)噬菌體的特征,擴(kuò)大培養(yǎng)體系中必須含有 宿主細(xì)胞
宿主細(xì)胞
,噬菌體才能繁殖。多次篩選后,目標(biāo)基因高效表達(dá)
目標(biāo)基因高效表達(dá)
的噬菌體得到高度富集。【考點(diǎn)】噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn);目的基因的篩選與獲取.
【答案】DNA的半保留復(fù)制;乙和C;它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu);限制酶和DNA連接酶;抗原—抗體雜交;抗體的結(jié)合具有特異性;具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體;宿主細(xì)胞;目標(biāo)基因高效表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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1.同位素標(biāo)記法在DNA是主要遺傳物質(zhì)的認(rèn)知?dú)v程和DNA的復(fù)制特點(diǎn)的探索方面都有所運(yùn)用.回答下列問(wèn)題:
(1)赫爾希和蔡斯的T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn),不用14C和18O同位素標(biāo)記的原因是
(2)若一個(gè)核DNA均為15N標(biāo)記的果蠅(2n=18)精原細(xì)胞,增殖過(guò)程中消耗的原料均不含15N,則:
①該精原細(xì)胞通過(guò)有絲分裂進(jìn)行增殖時(shí),第一次有絲分裂產(chǎn)生的每個(gè)子細(xì)胞內(nèi)有
②該精原細(xì)胞通過(guò)減數(shù)分裂產(chǎn)生配子時(shí),配子中有
③綜上分析,細(xì)胞增殖過(guò)程中著絲點(diǎn)第
(3)DNA是主要的遺傳物質(zhì),該處“主要”的含義是發(fā)布:2025/1/21 8:0:1組卷:14引用:1難度:0.5 -
2.如圖是著名的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)和肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的部分步驟:
(1)赫爾希和蔡斯采用的實(shí)驗(yàn)方法是
(2)若要大量制備32P標(biāo)記的噬菌體,需先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)
(3)從圖中所示結(jié)果分析,該實(shí)驗(yàn)標(biāo)記的是
(4)如圖的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”得出的結(jié)論是發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:13引用:1難度:0.5 -
3.λ噬菌體的線性雙鏈DNA兩端各有一段單鏈序列,這種噬菌體在侵染大腸桿菌后DNA會(huì)自連環(huán)化,如圖。關(guān)于λ噬菌體的說(shuō)法,不正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:26引用:1難度:0.7
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