豬、牛、羊或其它哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白，可以選用這些動(dòng)物的血液為實(shí)驗(yàn)材料來(lái)提取和分離血紅蛋白。如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分裝置和操作方法，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步，圖甲代表其中的

粗分離

粗分離

。圖乙代表向凝膠色譜柱中加樣的操作，正確的操作順序是

②③④①

②③④①

（填圖中數(shù)字序號(hào)）。
（2）對(duì)樣品處理時(shí)，釋放血紅蛋白的操作中加入蒸餾水的作用是

使紅細(xì)胞吸水漲破

使紅細(xì)胞吸水漲破

；然后加入40%體積的

甲苯

甲苯

，作用是

溶解細(xì)胞膜，加速紅細(xì)胞的破裂

溶解細(xì)胞膜，加速紅細(xì)胞的破裂

。
（3）凝膠色譜柱法可以對(duì)提取的血紅蛋白進(jìn)行純化，在對(duì)色譜柱填料進(jìn)行處理時(shí)，為了加速凝膠的膨脹，可以將加入洗脫液的濕凝膠用

沸水浴

沸水浴

進(jìn)行加熱，這種方法不但節(jié)約時(shí)間，而且能除去凝膠中可能帶有的微生物，排出膠粒內(nèi)的

空氣

空氣

。在蛋白質(zhì)分離過(guò)程中，如果紅色區(qū)帶在洗脫過(guò)程中

均勻一致地移動(dòng)

均勻一致地移動(dòng)

，說(shuō)明色譜柱制作成功。