家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力,將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。請回答:
(1)采用PCR技術(shù)可擴(kuò)增干擾素基因。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、ATP、對干擾素基因特異性的DNA引物對對干擾素基因特異性的DNA引物對和酶。PCR技術(shù)采用加熱到90-95℃加熱到90-95℃方法打開DNA雙鏈。
(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,能以干擾素基因產(chǎn)生的mRNA作為模板按照堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對原則獲得cDNA片段。
(3)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
(4)基因工程常用質(zhì)粒作為運(yùn)載體,理由是有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存并復(fù)制、有標(biāo)記基因有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存并復(fù)制、有標(biāo)記基因(寫出3點(diǎn))。
(5)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用的方法是顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵受精卵。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】對干擾素基因特異性的DNA引物對;加熱到90-95℃;堿基互補(bǔ)配對;胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存并復(fù)制、有標(biāo)記基因;顯微注射技術(shù);受精卵
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:1難度:0.7
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