馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ除作為植物儲(chǔ)藏蛋白外,還可以作為植物抵抗昆蟲(chóng)侵害的重要手段。科研人員克隆了馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ基因的cDNA(PINⅠ),構(gòu)建了基因表達(dá)載體(如圖),并將其轉(zhuǎn)化到水稻中,使水稻自身產(chǎn)生抗蟲(chóng)蛋白而達(dá)到抗蟲(chóng)目的。請(qǐng)回答問(wèn)題。
(1)馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ在 核糖體核糖體(填細(xì)胞結(jié)構(gòu))中合成后運(yùn)輸?shù)揭号葜袃?chǔ)存,以免被細(xì)胞中的 蛋白酶蛋白酶降解;昆蟲(chóng)取食植物,馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ與昆蟲(chóng)消化道內(nèi)的蛋白酶形成酶—抑制劑復(fù)合物,最終導(dǎo)致昆蟲(chóng)因缺乏代謝中必需的 氨基酸氨基酸而死亡。
(2)過(guò)程①表示 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄。
(3)為了便于擴(kuò)增的PINⅡ基因與載體1連接,需要在引物F和引物R的 5'5'端分別添加AAGCTT序列和 TCTAGATCTAGA序列;PINⅡ擴(kuò)增完成最后一次循環(huán)后,仍需在72℃下繼續(xù)延伸5min,其主要目的是 使子鏈充分延伸使子鏈充分延伸。
(4)下列物質(zhì)中,屬于過(guò)程③正常進(jìn)行所必需的有 a、b、ea、b、e(填字母)。
a.限制酶XhoⅠb.限制酶HindⅢc.限制酶XbaⅠd.緩沖液 e.T4DNA連接酶 f.Taq DNA聚合酶
(5)過(guò)程⑦篩選時(shí),首先將愈傷組織取出,用無(wú)菌水清洗兩遍,以除去附著于愈傷組織表面的 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌菌液,然后轉(zhuǎn)移到含 潮霉素潮霉素的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng),挑選抗性愈傷組織誘導(dǎo)再分化。
(6)馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ具有誘導(dǎo)表達(dá)的特性。轉(zhuǎn)化的PINⅡ基因僅在植物受到傷害(如蟲(chóng)害)后表達(dá),其生物學(xué)意義在于既能減少 能量和物質(zhì)能量和物質(zhì)的浪費(fèi),又能延緩害蟲(chóng)對(duì)馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ產(chǎn)生 抗性抗性。
【答案】核糖體;蛋白酶;氨基酸;逆轉(zhuǎn)錄;5';TCTAGA;使子鏈充分延伸;a、b、e;農(nóng)桿菌;潮霉素;能量和物質(zhì);抗性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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