當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年江蘇省南通市如皋一中高三（上）開學(xué)生物試卷> 試題詳情

馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ除作為植物儲(chǔ)藏蛋白外，還可以作為植物抵抗昆蟲侵害的重要手段。科研人員克隆了馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ基因的cDNA（PINⅠ），構(gòu)建了基因表達(dá)載體（如圖），并將其轉(zhuǎn)化到水稻中，使水稻自身產(chǎn)生抗蟲蛋白而達(dá)到抗蟲目的。請(qǐng)回答問題。

（1）馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ在
核糖體
核糖體
（填細(xì)胞結(jié)構(gòu)）中合成后運(yùn)輸?shù)揭号葜袃?chǔ)存，以免被細(xì)胞中的
蛋白酶
蛋白酶
降解；昆蟲取食植物，馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ與昆蟲消化道內(nèi)的蛋白酶形成酶—抑制劑復(fù)合物，最終導(dǎo)致昆蟲因缺乏代謝中必需的
氨基酸
氨基酸
而死亡。
（2）過程①表示
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
。
（3）為了便于擴(kuò)增的PINⅡ基因與載體1連接，需要在引物F和引物R的
5'
5'
端分別添加AAGCTT序列和
TCTAGA
TCTAGA
序列；PINⅡ擴(kuò)增完成最后一次循環(huán)后，仍需在72℃下繼續(xù)延伸5min,其主要目的是
使子鏈充分延伸
使子鏈充分延伸
。
（4）下列物質(zhì)中，屬于過程③正常進(jìn)行所必需的有
a、b、e
a、b、e
（填字母）。
a.限制酶XhoⅠb.限制酶HindⅢc.限制酶XbaⅠd.緩沖液 e.T4DNA連接酶 f.Taq DNA聚合酶
（5）過程⑦篩選時(shí)，首先將愈傷組織取出，用無菌水清洗兩遍，以除去附著于愈傷組織表面的
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
菌液，然后轉(zhuǎn)移到含
潮霉素
潮霉素
的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)，挑選抗性愈傷組織誘導(dǎo)再分化。
（6）馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ具有誘導(dǎo)表達(dá)的特性。轉(zhuǎn)化的PINⅡ基因僅在植物受到傷害（如蟲害）后表達(dá)，其生物學(xué)意義在于既能減少
能量和物質(zhì)
能量和物質(zhì)
的浪費(fèi)，又能延緩害蟲對(duì)馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ產(chǎn)生
抗性
抗性
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)；基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．

【答案】核糖體；蛋白酶；氨基酸；逆轉(zhuǎn)錄；5'；TCTAGA；使子鏈充分延伸；a、b、e；農(nóng)桿菌；潮霉素；能量和物質(zhì)；抗性

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/5/28 8:0:9組卷：6引用：4難度：0.5

相似題

1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強(qiáng)的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是（　?。?br />
注：①交錯(cuò)延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

A．若用EcoRⅠ（5'-G↓AATTC-3'）和限制酶XmaⅠ（5'-G↓CCGGG-3'）雙酶切多個(gè)目的基因，能避免兩個(gè)目的基因連接成環(huán)

B．復(fù)制原點(diǎn)是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)

C．在培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加卡那霉素可以篩選含有Bt重組基因的細(xì)胞

D．圖中生長(zhǎng)素合成酶基因不能促進(jìn)愈傷組織生根

發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

解析

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

3．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />