利用基因工程獲取人干擾素-α的方法有兩種:一是將IFN-α基因?qū)爰?xì)菌,從細(xì)胞外分離獲??;二是將IFN-α基因?qū)氘叧嘟湍妇Y(jié)合現(xiàn)代工藝從細(xì)胞內(nèi)獲取。請(qǐng)回答:
(1)基因工程中構(gòu)建的表達(dá)載體一般包括 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子序列、目的基因和終止子序列。其中標(biāo)記基因的作用是 篩選重組質(zhì)粒篩選重組質(zhì)粒,啟動(dòng)子是 RNA聚合RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)。
(2)微生物代謝中合成用于自身生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)稱為初級(jí)代謝產(chǎn)物,隨后產(chǎn)生并分泌到細(xì)胞外的生物堿、抗菌素及細(xì)菌毒素稱為次級(jí)代謝產(chǎn)物。將IFN-α基因?qū)爰?xì)胞,由于缺少細(xì)胞器 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與肽鏈的加工導(dǎo)致表達(dá)的干擾素-α無(wú)糖鏈結(jié)構(gòu);從產(chǎn)物角度分析,將該基因?qū)虢湍妇c導(dǎo)入細(xì)菌相比獲得的抗生素更純且活性更高的原因有 細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用。(答兩點(diǎn))。
(3)畢赤酵母菌在發(fā)酵罐中具有高密度的特點(diǎn),下圖示營(yíng)養(yǎng)比例及氧氣含量對(duì)酵母菌產(chǎn)干擾素-α的影響結(jié)果。
①酵母菌培養(yǎng)基中的蛋白粉被用作 氮源氮源。
②5%O2條件下,后期干擾素-α合成量急劇下降的原因可能是 酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精毒害酵母菌。制備酵母培養(yǎng)基的過(guò)程中,除了配制相關(guān)的營(yíng)養(yǎng)成分外,還需要 適宜的溫度和pH適宜的溫度和pH保證酶的活性。生產(chǎn)上為節(jié)約成本,一般在發(fā)酵的后期可通過(guò)補(bǔ)充 適當(dāng)比例的碳源和氮源適當(dāng)比例的碳源和氮源并適當(dāng) 通入純凈空氣通入純凈空氣。
【答案】復(fù)制原點(diǎn);篩選重組質(zhì)粒;RNA聚合;內(nèi)質(zhì)網(wǎng);細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外;避免細(xì)菌毒素的副作用;氮源;酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精;適宜的溫度和pH;適當(dāng)比例的碳源和氮源;通入純凈空氣
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.5
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1.MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC,圖中圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
若要用上圖質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,需要對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行改造,構(gòu)建新的限制酶酶切位點(diǎn)。在構(gòu)建新的限制酶酶切位點(diǎn)的過(guò)程中需要使用的酶是( ?。?/h2>A.限制酶PstⅠ、DNA連接酶、DNA聚合酶 B.限制酶EcoRⅠ、DNA連接酶、DNA聚合酶 C.限制酶EcoRⅠ、限制酶PstⅠ、DNA聚合酶 D.限制酶PstⅠ、限制酶EcoRⅠ、DNA連接酶 發(fā)布:2024/11/25 20:30:1組卷:21引用:2難度:0.6 -
2.為了構(gòu)建重組DNA疫苗,可將不同的抗原DNA片段進(jìn)行重組,圖中A、B載體有三個(gè)酶切位點(diǎn),其中BclⅠ和BamHⅠ識(shí)別并切割的核苷酸序列相同,如圖所示?,F(xiàn)對(duì)A載體和B載體分別進(jìn)行雙酶切得到含A載體片段和含B載體片段,經(jīng)DNA連接酶得到BA載體,需要使用的酶分別是( )
選項(xiàng) A載體 B載體 A ①+② ①+③ B ①+③ ①+② C ①+③ ①+③ D ①+② ①+② A.A B.B C.C D.D 發(fā)布:2024/11/25 23:30:2組卷:25引用:1難度:0.5 -
3.基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性內(nèi)切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn)分別如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是( )
A.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體 B.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體 C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后,含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán) D.用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,只能產(chǎn)生一種重組DNA 發(fā)布:2024/12/4 20:0:1組卷:42引用:4難度:0.6
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