在轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的研究過程中，采用了圖示質(zhì)粒。其上有SalⅠ，HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，獲得此質(zhì)粒的農(nóng)桿菌表現(xiàn)出對兩種抗生素的抗性。
（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用 HindⅢHindⅢ和SalⅠ兩種限制酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒，可防止 目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接。
（2）用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農(nóng)桿菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)含有目的基因的農(nóng)桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，這說明 抗四環(huán)素基因被破壞抗四環(huán)素基因被破壞。
（3）采用農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞是因其體內(nèi)的重組Ti質(zhì)粒上的 T-DNAT-DNA能將目的基因插入到煙草細(xì)胞的染色體DNA上。
（4）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草植株，依據(jù)的原理是 植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性。
（5）導(dǎo)入抗鹽基因的煙草是否可以表達(dá)其遺傳特性，需檢測 抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)，除上述分子水平檢測外還需進(jìn)行 個(gè)體水平上抗鹽個(gè)體水平上抗鹽鑒定。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】HindⅢ；目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接；抗四環(huán)素基因被破壞；T-DNA；植物細(xì)胞的全能性；抗鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質(zhì)；個(gè)體水平上抗鹽
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/8/14 7:0:1組卷：2引用：1難度：0.5
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