腺病毒載體因其轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、宿主細(xì)胞范圍廣以及可以感染不同時(shí)期的細(xì)胞等優(yōu)點(diǎn)成為應(yīng)用最廣泛的活病毒載體之一,腺病毒是雙鏈DNA病毒,其基因組中的E1區(qū)含有腺病毒復(fù)制的必需基因。回答下列問題:
(1)利用腺病毒為載體生產(chǎn)疫苗時(shí),一般將完整的抗原基因插入到缺失E1區(qū)的腺病毒中,該過程中用到的工具酶有
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
;抗原基因表達(dá)時(shí)啟動(dòng)子的功能是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
;該種載體的優(yōu)點(diǎn)是 能避免病毒(DNA的)復(fù)制,安全性高
能避免病毒(DNA的)復(fù)制,安全性高
。
(2)培養(yǎng)腺病毒需要以人胚胎腎細(xì)胞293(HEK293細(xì)胞)為宿主細(xì)胞,該細(xì)胞具有轉(zhuǎn)染效率高,易于培養(yǎng)等特點(diǎn)。培養(yǎng)HEK293細(xì)胞的培養(yǎng)基中除營養(yǎng)物質(zhì)外還需要加入 血清(血漿)
血清(血漿)
等天然成分,且氣體環(huán)境應(yīng)設(shè)置為 95%空氣加5%CO2
95%空氣加5%CO2
。
(3)我國研發(fā)的重組新冠病毒疫苗以改造后的人5型腺病毒為載體,構(gòu)建攜帶抗原基因—S蛋白基因的重組病毒,重組病毒轉(zhuǎn)染改造后的HEK293細(xì)胞,擴(kuò)大培養(yǎng)宿主細(xì)胞后經(jīng)純化可獲得懸浮液,再與輔料配制成肌肉注射劑,注射后可使接種者獲得對(duì)新冠病毒的免疫能力,上述流程中擴(kuò)大培養(yǎng)宿主細(xì)胞的目的是 重組腺病毒可借助宿主細(xì)胞大量增殖以提高重組病毒的濃度
重組腺病毒可借助宿主細(xì)胞大量增殖以提高重組病毒的濃度
;接種者可獲得對(duì)新冠病毒的免疫能力的原因是 重組腺病毒感染人體細(xì)胞后,表達(dá)出的S蛋白作為抗原刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞
重組腺病毒感染人體細(xì)胞后,表達(dá)出的S蛋白作為抗原刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞
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