現(xiàn)有質(zhì)粒甲(含有2686個堿基對,不含T-DNA)和乙,它們上面都有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位點,研究人員用這兩種限制酶切割質(zhì)粒甲和乙,然后重新構(gòu)建了含有目的基因的重組質(zhì)粒丙(如圖所示)。接著,再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細胞,培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請回答下列問題。
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是 將VP1基因插入T-DNA中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上將VP1基因插入T-DNA中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上,利用質(zhì)粒甲和乙構(gòu)建質(zhì)粒丙的過程中,用到的工具酶是 限制酶I、Ⅱ和DNA連接酶限制酶I、Ⅱ和DNA連接酶。
(2)實驗過程中,將愈傷組織浸入農(nóng)桿菌(含質(zhì)粒丙)培養(yǎng)液中一段時間,其目的是 利用農(nóng)桿菌感染植物,將VP1基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中利用農(nóng)桿菌感染植物,將VP1基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中。
(3)用限制酶Ⅰ和Ⅱ分別切割質(zhì)粒甲、乙、丙,結(jié)果如表所示:
結(jié)果 | 切割后所得DNA片段的情況 |
1 | 得到分別含有2146和540個堿基對的2種DNA片段 |
2 | 得到分別含有540和12400個堿基對的2種DNA片段 |
3 | 得到分別含有12400和1000個堿基對的2種DNA片段 |
0
0
個游離的磷酸基團,限制酶Ⅰ在質(zhì)粒甲中有 1
1
個切割位點,表中 2
2
(填序號)是切割質(zhì)粒丙的結(jié)果。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】將VP1基因插入T-DNA中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上;限制酶I、Ⅱ和DNA連接酶;利用農(nóng)桿菌感染植物,將VP1基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中;0;1;2
【解答】
【點評】
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