白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。（tsr為一種抗生素-硫鏈絲菌素的抗性基因）
（1）提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是PstⅠ和HindⅢPstⅠ和HindⅢ，不能使用限制酶SmaⅠ的原因是限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會(huì)造成目的基因斷裂限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會(huì)造成目的基因斷裂。
（2）除圖示方法外，也可從利用反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和引物引物等。
（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的T-DNAT-DNA。
（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞，需要在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素硫鏈絲菌素。最終為了檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá)，可通過抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法進(jìn)行分子水平的檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PstⅠ和HindⅢ；限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會(huì)造成目的基因斷裂；反轉(zhuǎn)錄；引物；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；T-DNA；硫鏈絲菌素；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：2難度：0.6
相似題
-
1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
相關(guān)試卷