利用乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)人白細胞介素2（hIL-2）和與其具有協(xié)同作用的融合蛋白（由兩個單獨基因編碼的結(jié)構(gòu)域組成的蛋白質(zhì)）藥物，但融合蛋白常難以發(fā)揮各組分的正常功能。研究發(fā)現(xiàn)，口蹄疫病毒2A肽（FMDV 2A）是一種“自切割”多肽，能將自身切成4個片段，可用于構(gòu)建多基因表達載體。如圖是構(gòu)建FMDV 2A介導(dǎo)的hIL-2基因和增強型綠色熒光蛋白（EGFP）基因乳腺特異性表達載體，并驗證其在乳腺上皮細胞中表達的主要過程，以期為提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能奠定基礎(chǔ)。請回答下列問題。
（1）過程①應(yīng)選用的引物是 引物2和引物3引物2和引物3，該過程除加入引物外，還需加入 耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等。
（2）下面4種引物可用于過程①的是 P1和P2P1和P2。
P1：5'-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3'
P2：5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3'
P3：5'-CCCTCGAGATGTACAGGATGCAACTCCT-3'
P4：5'-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3'
（3）過程③中，使用人工膜制成的脂質(zhì)體將質(zhì)粒3導(dǎo)入受體細胞，其主要原理是 生物膜具有一定的流動性生物膜具有一定的流動性。
（4）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細胞置于含 新霉素新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)、篩選；將篩選出的細胞置于含催乳素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，利用熒光顯微鏡觀察 是否有綠色熒光是否有綠色熒光，進一步篩選出轉(zhuǎn)染成功的細胞，培養(yǎng)液中加入催乳素的作用是 誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達。
（5）過程④中，乳腺上皮細胞中檢測到游離的hIL-2，原因是 目的基因未成功導(dǎo)入受體細胞的染色體DNA上目的基因未成功導(dǎo)入受體細胞的染色體DNA上。與生產(chǎn)融合蛋白藥物相比，此項研究有望提高乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的效能，主要表現(xiàn)是 實現(xiàn)了兩個基因的合并表達，能夠使兩者同時起作用實現(xiàn)了兩個基因的合并表達，能夠使兩者同時起作用。
（6）研究人員試圖以轉(zhuǎn)染成功的奶牛乳腺上皮細胞作為供體，培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因克隆胚胎，主要涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有 ）動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)）動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物2和引物3；耐高溫的TaqDNA聚合酶、原料等；P1和P2；生物膜具有一定的流動性；新霉素；是否有綠色熒光；誘導(dǎo)乳腺蛋白基因表達；目的基因未成功導(dǎo)入受體細胞的染色體DNA上；實現(xiàn)了兩個基因的合并表達，能夠使兩者同時起作用；）動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/4 8:0:5組卷：9引用：1難度：0.4
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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