為探究某病菌對(duì)棉花的侵染路徑，研究人員利用綠色熒光蛋白基因（sGFP）轉(zhuǎn)化該種病菌，培育出表達(dá)綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株，并讓其感染棉花植株，主要過(guò)程如圖。其中a鏈和b鏈分別是相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈。相關(guān)限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)為：HidⅢ--5'G↓GATCC3'；BamHⅠ--5'A↓AGCTT3'。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）過(guò)程②操作時(shí)，除圖中標(biāo)注物質(zhì)外，還需要用 微量移（或?。┮浩?/div>微量移（或?。┮浩?/div>向微量離心管中加入 緩沖液緩沖液、原料原料、Taq酶Taq酶和水。至少需經(jīng)過(guò) 33次擴(kuò)增可獲得8條長(zhǎng)度為0.7Kb的脫氧核苷酸鏈。為保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物1的5′端添加限制酶 BamHIBamHI的識(shí)別序列，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5′→3′）為 GATCGATC。
（2）過(guò)程③需要的工具酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。經(jīng)過(guò)過(guò)程①③可獲得長(zhǎng)度為 0.950.95Kb和4.2Kb的兩種重組環(huán)狀DNA。過(guò)程⑤中通過(guò) 培養(yǎng)基中添加潮霉素培養(yǎng)基中添加潮霉素淘汰只導(dǎo)入不符合要求的重組環(huán)狀DNA的受體菌。
（3）過(guò)程④常采用的方法是 用Ca2+處理用Ca2+處理。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【答案】微量移（或?。┮浩?；緩沖液；原料；Taq酶；3；BamHI；GATC；限制酶和DNA連接酶；0.95；培養(yǎng)基中添加潮霉素；用Ca2+處理【解答】【點(diǎn)評(píng)】聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：1難度：0.5
相似題
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
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2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括 和 。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是 。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的 。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有 和 ，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是 。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是 。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是 。
微量移（或?。┮浩?/div>向微量離心管中加入
（2）過(guò)程③需要的工具酶是
（3）過(guò)程④常采用的方法是
緩沖液
緩沖液
、原料
原料
、Taq酶
Taq酶
和水。至少需經(jīng)過(guò) 3
3
次擴(kuò)增可獲得8條長(zhǎng)度為0.7Kb的脫氧核苷酸鏈。為保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物1的5′端添加限制酶 BamHI
BamHI
的識(shí)別序列，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5′→3′）為 GATC
GATC
。（2）過(guò)程③需要的工具酶是
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。經(jīng)過(guò)過(guò)程①③可獲得長(zhǎng)度為 0.95
0.95
Kb和4.2Kb的兩種重組環(huán)狀DNA。過(guò)程⑤中通過(guò) 培養(yǎng)基中添加潮霉素
培養(yǎng)基中添加潮霉素
淘汰只導(dǎo)入不符合要求的重組環(huán)狀DNA的受體菌。（3）過(guò)程④常采用的方法是
用Ca2+處理
用Ca2+處理
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】微量移（或?。┮浩?；緩沖液；原料；Taq酶；3；BamHI；GATC；限制酶和DNA連接酶；0.95；培養(yǎng)基中添加潮霉素；用Ca2+處理
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：1難度：0.5
相似題
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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