纖毛是廣泛存在的細胞表面結(jié)構(gòu)，功能異常可引起多種疾病。因此，研究纖毛形成的作用機制具有重要意義。請回答下列問題。
（1）纖毛結(jié)構(gòu)如圖1所示，由細胞膜延伸形成的纖毛膜主要由中心體轉(zhuǎn)變而來，中心體在有絲分裂中的功能是 參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心。
（2）某病人腎小管上皮細胞纖毛異常，為了分析纖毛相關(guān)基因X是否發(fā)生了變異，對基因X進行了PCR擴增與產(chǎn)物測序。從細胞樣品中分離DNA時，可通過交替調(diào)節(jié)鹽濃度將與核蛋白結(jié)合的DNA分離出來，溶液中添加NaCl至2.0mo1/L的目的是 溶解DNA溶解DNA。PCR擴增時，需在 耐高溫DNA聚合酶耐高溫DNA聚合酶催化下，在引物 3'3'端進行DNA鏈的延伸，獲得擴增產(chǎn)物用于測序。
（3）為研究蛋白質(zhì)X在細胞中的定位，構(gòu)建綠色熒光蛋白GFP與X的融合蛋白，融合蛋白具有綠色熒光，可示其在細胞內(nèi)位置。將X-GFP基因融合片段M導入如圖Ⅱ所示載體質(zhì)粒Y，構(gòu)建Y-M重組質(zhì)粒（在EcoRV位點插入片段）。請完成如表。
| 分步實驗目標 | 簡易操作、結(jié)果、分析 |
| PCR鑒定正向重組質(zhì)粒Y-M（圖Ⅱ中融合片段M中有白色的箭頭，代表方向） | ①選擇圖Ⅱ引物 a、b a、b ；②PCR目的產(chǎn)物約為 1100 1100 bp。 |
| 確保M及連接處序列正確，Y-M的連接處上游含有HindⅢ+ECoRⅤ的識別序列，下游含有EcoRⅤ+BamHⅠ的識別序列 | ③質(zhì)粒測序，圖Ⅲ中正確的是 Q4 Q4 （選填序列編號） |
| 檢測融合蛋白定位 | ④對照質(zhì)粒Y-GFP（僅表達GFP）與實驗質(zhì)粒Y-M分別導入細胞，發(fā)現(xiàn)對照組整個細胞均有綠色熒光，而實驗組熒光集中在纖毛基部，說明X蛋白參與 中心體 中心體 的形成。 |
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
形成cDNA作為模板，PCR擴增結(jié)果顯示，在總cDNA模板量相等的條件下，健康人Ct值為15，而病人Ct值為20（Ct值是產(chǎn)物熒光強度達到設定閾值時的PCR循環(huán)數(shù)）。【答案】參與紡錘體的形成，是紡錘體形成中心；溶解DNA；耐高溫DNA聚合酶；3'；a、b；1100；Q4；中心體；逆轉(zhuǎn)錄
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/24 14:0:35組卷：21引用：1難度：0.5
相似題
-
1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
把好題分享給你的好友吧~~