人血清白蛋白（HSA）是血漿蛋白的主要成分，具有維持血漿滲透壓和進行物質運輸?shù)墓δ?。利用基因工程生產重組人血清白蛋白（rHSA）可解決HSA短缺問題?？蒲腥藛T依據(jù)基因組中HSA基因的堿基序列，同時考慮生產菌X（一種組氨酸缺陷型酵母菌）的生理特點，人工設計了rHSA基因。圖1表示HSA基因，圖2為基因工程所用質粒及相關元件（基因S控制合成信號肽，能引導后續(xù)合成的肽鏈進入內質網腔；HIS4控制合成組氨酸）。請回答下列問題：
（1）若要擴增出HSA基因并用于表達載體的構建，應選擇的引物是 引物Ⅱ和引物Ⅰ引物Ⅱ和引物Ⅰ，其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸。
（2）將rHSA基因構建在S基因后形成融合基因，目的是 可以讓rHSA具有信號肽，有利于其進入內質網中進行加工可以讓rHSA具有信號肽，有利于其進入內質網中進行加工。
（3）rHSA基因導入生產菌X需要經過兩次篩選：第一次在含有 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基中篩選得到含rHSA基因表達載體的大腸桿菌；第二次篩選時，將上述大腸桿菌與生產菌X混合，然后在 不含組氨酸不含組氨酸的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可在此培養(yǎng)基上生長的生產菌X含有rHSA基因表達載體。HSA基因表達載體既可在大腸桿菌中又可在生產菌X中穩(wěn)定遺傳的原因是 該基因表達載體上既有原核生物復制原點，又有真核生物復制原點該基因表達載體上既有原核生物復制原點，又有真核生物復制原點。
（4）AOX1為甲醇氧化酶的啟動子，以其作為rHSA基因的啟動子時，在以甲醇為碳源的培養(yǎng)基中rHSA基因正常表達，無甲醇時該基因不表達。從生產控制的角度分析，選用AOX1作為rHSA基因的啟動子的優(yōu)點是 可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物Ⅱ和引物Ⅰ；使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸；可以讓rHSA具有信號肽，有利于其進入內質網中進行加工；氨芐青霉素；不含組氨酸；該基因表達載體上既有原核生物復制原點，又有真核生物復制原點；可以通過控制培養(yǎng)液中甲醇的有無來控制rHSA基因的表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/2 8:0:9組卷：12引用：2難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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