人干擾素(IFN)是機體免疫細胞產(chǎn)生的一類細胞因子。用白細胞生產(chǎn)干擾素時,每個細胞最多只能產(chǎn)生100~1000個干擾素分子,而用基因工程技術改造的大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn),在1~2天內(nèi)每個菌體能產(chǎn)生20萬個干擾素分子。
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(1)基因工程的核心步驟是 構建基因表達載體構建基因表達載體。此步驟需要的工具酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,其作用部位都是磷酸二酯鍵。圖中四環(huán)素抗性基因的作用是用于 作為標記基因,篩選重組質(zhì)粒作為標記基因,篩選重組質(zhì)粒。
(2)PCR技術所依據(jù)的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制。在PCR反應體系中一般需要加入Mg2+的原因是 Mg2+能激活DNA聚合酶Mg2+能激活DNA聚合酶。
(3)使用大腸桿菌作為工程菌,導入重組質(zhì)粒時要用含 Ca2+Ca2+溶液處理,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(感受態(tài))。酵母菌或大腸桿菌都可作受體細胞,但上述過程最好選用 酵母菌酵母菌(填“酵母菌”或“大腸桿菌”),理由是 酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細胞器,能對蛋白質(zhì)進行加工酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細胞器,能對蛋白質(zhì)進行加工。
(4)干擾素基因在工程菌中也能合成人體所需的干擾素,說明生物界中幾乎所有生物 都共用一套遺傳密碼都共用一套遺傳密碼。
(5)天然的干擾素在體外保存相當困難,為了生產(chǎn)出耐儲存干擾素,科學家可通過 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程獲得這種新藥,具體流程是:從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有的氨基酸序列推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→使用工程菌獲得耐儲存的干擾素。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】構建基因表達載體;限制酶和DNA連接酶;作為標記基因,篩選重組質(zhì)粒;DNA半保留復制;Mg2+能激活DNA聚合酶;Ca2+;酵母菌;酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細胞器,能對蛋白質(zhì)進行加工;都共用一套遺傳密碼;蛋白質(zhì);推測應有的氨基酸序列;找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.6
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