某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連續(xù)反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因,含有質(zhì)粒載體,含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題:
(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有 能自我復制、具有標記基因能自我復制、具有標記基因(答出兩點即可)。而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有 啟動子啟動子和 終止子終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是 二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長;并且載體和重組質(zhì)粒的細胞也是不能區(qū)分的,其原因是 二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有 四環(huán)素四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。
【答案】能自我復制、具有標記基因;啟動子;終止子;二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長;二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長;四環(huán)素
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:58引用:1難度:0.7
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